鏈脲佐菌素致原代培養(yǎng)大鼠皮層神經(jīng)元損傷作用以及吡格列酮和Humanin的保護(hù)作用觀察.pdf

1、山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文鏈脲佐菌素致原代培養(yǎng)大鼠皮層神經(jīng)元損傷作用以及吡格列酮和Humanin的保護(hù)作用觀察姓名：馬國英申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生理學(xué)指導(dǎo)教師：張策20100530山西醫(yī)科大學(xué)碩上學(xué)位論文在整體動物實(shí)驗(yàn)條件下包括腹腔注射及腦室注射STZ可以干擾胰島素的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，引起糖代謝紊亂，同時(shí)引起神經(jīng)損傷及形成AD樣的退行性病變，那么在離體培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞STZ是否可引起同樣的神經(jīng)損傷吡格列酮(Pioglitazone)屬于噻唑烷

2、二酮(tIliazolid硫dio鵬，TZD)類胰島素增敏劑，主要通過結(jié)合和活化過氧化物酶體增殖物激活的受體丫(peroxisomeprolifbratorsactiVatedrec印tors，PP√佻)而增強(qiáng)細(xì)胞對胰島素作用的敏感性。毗格列酮對側(cè)腦室注射STZ的大鼠的空間記憶力和海馬的突觸結(jié)構(gòu)和神經(jīng)元的受損有保護(hù)作用。而同樣屬于噻唑烷二酮類胰島素增敏劑的羅格列酮對散發(fā)性老年癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶功能有明顯的改善作用。DelaMonte等研究

3、發(fā)現(xiàn)噻唑烷二酮類胰島素增敏劑可能對AD有預(yù)防治療的作用。那么噻唑烷二酮類胰島素增敏劑吡格列酮是否對STZ誘導(dǎo)的皮層神經(jīng)細(xì)胞損傷也有保護(hù)作用刪是在AD患者大腦內(nèi)發(fā)現(xiàn)的由24個(gè)氨基酸組成的線性多肽，能夠有效抑制多種FAD(F鋤ilyAkmeimer’sdisease)基因突變和Ap衍生物誘發(fā)的神經(jīng)毒作用，初始被認(rèn)為是AD特異性或AD相關(guān)毒性的神經(jīng)保護(hù)肽。HN可抑制APP，PSl，PS2突變誘發(fā)的神經(jīng)元死亡，拮抗Ap完整肽鏈以及AD片斷誘導(dǎo)的

4、神經(jīng)毒作用，但其作用機(jī)制還不清楚。隨著科學(xué)研究的逐步深入以及我們實(shí)驗(yàn)室的研究發(fā)現(xiàn)，HN可以拮抗N加A所致的興奮毒，拮抗缺氧所致的皮層神經(jīng)元損傷，拮抗OA通過誘導(dǎo)tau蛋白過度磷酸化所致的神經(jīng)毒。提示烈具有廣泛的神經(jīng)保護(hù)作用，那么HN是否對STZ的神經(jīng)損傷有保護(hù)作用基于以上分析，本實(shí)驗(yàn)分三部分，第一部分是觀察STZ對培養(yǎng)皮層神經(jīng)細(xì)胞的損傷作用(包括乳酸脫氫酶，CCK8和CalcenAM染色)；第二部分是觀察吡格列酮對STZ誘導(dǎo)的培養(yǎng)皮層神

5、經(jīng)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用；第三部分是烈對STZ誘導(dǎo)的培養(yǎng)皮層神經(jīng)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。第一部分STZ對培養(yǎng)皮層神經(jīng)細(xì)胞的損傷作用本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用離體原代培養(yǎng)皮層神經(jīng)細(xì)胞的方法，培養(yǎng)到第8天時(shí)，加入不同濃度的STZ溶液(1“mo】／L，10“mo兒，100“mo】／L，1000肛Inol／L)和胰島素(15u／mL)。36小時(shí)后觀察細(xì)胞的活力以及活細(xì)胞數(shù)目(乳酸脫氫酶、CCK8和CalceillAM染色)。結(jié)果顯示：(1)細(xì)胞活力檢測(cck8)，加

6、入STZ36小時(shí)后，胰島素組與空白對照組相比細(xì)胞活力無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與對照組相比，STZ(1肛m01／L)和STZ(10“mol／L)組細(xì)胞活力分別下降1888％和2774％(p／005，n=4)；STZ(100岫∞l／L)和STZ(1000“mol／L)細(xì)胞活力分別下降3709％和4088％(氏001，一)；(2)CalcenAM染色，胰島素組與空白對照組比較活細(xì)胞的數(shù)量沒有明顯變化，STZ(1“mol／L)和STZ(10“mol／L)