外源性表皮生長(zhǎng)因子對(duì)內(nèi)毒素型急性肺損傷家兔肺水轉(zhuǎn)運(yùn)的研究.pdf

1、急性肺損傷(ALI)是常見的呼吸系統(tǒng)急危重癥，是由心源性以外的各種肺內(nèi)外致病因素導(dǎo)致的急性、進(jìn)行性缺氧性呼吸衰竭。臨床及實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)ALI主要病理改變?yōu)檠装Y反應(yīng)導(dǎo)致肺毛細(xì)血管內(nèi)皮和肺泡上皮損傷，肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、結(jié)構(gòu)破壞、發(fā)生凋亡或壞死，由中性粒細(xì)胞為主介導(dǎo)的肺臟局部炎癥反應(yīng)致肺毛細(xì)血管通透性增高性肺水腫，肺泡液滲出，形成富含蛋白質(zhì)的肺水腫及透明膜形成，并伴有肺間質(zhì)纖維化。ALI發(fā)病機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜，迄今尚未充分闡明，而且多數(shù)病例常于發(fā)

2、病數(shù)天內(nèi)死亡。因此，對(duì)ALI的診治至今仍然是一個(gè)挑戰(zhàn)。 目前，ALI的治療除了通過機(jī)械通氣外?，F(xiàn)有的藥物治療還有：NO吸入、糖皮質(zhì)激素、山莨菪堿(654-2)和其它血管擴(kuò)張劑，治療機(jī)制主要是抑制細(xì)胞因子、脂質(zhì)炎性介質(zhì)、細(xì)胞粘附分子等多種炎性介質(zhì)的產(chǎn)生以及清除自由基減輕脂質(zhì)過氧化對(duì)ALI發(fā)揮治療作用，降低肺微血管阻力及毛細(xì)血管通透性，改善微循環(huán)，減輕微循環(huán)障礙引起的肺損傷。以上方法雖然在治療ALI方面取得了很大進(jìn)步，尤其對(duì)早期AL

3、I療效較明顯，而對(duì)嚴(yán)重的ALI仍無明顯的改善作用。由于其導(dǎo)致急性呼吸衰竭和多器官功能衰竭的機(jī)制尚不完全清楚，病死率還很高，治療策略仍在不斷完善和探索中。 近年來，利用生物學(xué)方法防治ALI越來越受到重視，其中表皮生長(zhǎng)因子(EFG)，國(guó)內(nèi)外已在動(dòng)物模型中進(jìn)行研究，實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)外源性EFG對(duì)ALI大鼠肺泡Ⅱ型細(xì)胞能顯著增殖數(shù)量，提示外源性EFG具有較好的保護(hù)肺泡上皮功能，從而減輕肺損傷。但EFG對(duì)肺毛血管內(nèi)皮功能及減少滲出，對(duì)肺水轉(zhuǎn)運(yùn)

4、的研究較少報(bào)道。肺血管內(nèi)皮功能在急性肺損傷(ALI)的發(fā)病及治療中均占重要地位，EFG能刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的移行和增殖，刺激內(nèi)皮細(xì)胞合成DNA。對(duì)肺血管起修復(fù)作用，減少肺水腫的產(chǎn)生，從而提高ALI的逆轉(zhuǎn)、改善作用。從理論上分析，具有較好的研究和應(yīng)用前景。為了證明這一設(shè)想，并研究這種作用的分子病理學(xué)特征，本課題擬通過利用外源性表皮生長(zhǎng)因?qū)?nèi)毒素型急性肺損傷家兔肺水轉(zhuǎn)運(yùn)的研究，分析EGF對(duì)ALI血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖及對(duì)其通透性一肺水轉(zhuǎn)運(yùn)的影響作

5、用。 研究目的: 本實(shí)驗(yàn)通過利用外源性表皮生長(zhǎng)因?qū)?nèi)毒素型急性肺損傷家兔肺水轉(zhuǎn)運(yùn)的研究，評(píng)價(jià)EGF對(duì)ALI血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖及對(duì)其通透性的影響作用。 對(duì)象與方法: 1．動(dòng)物：家兔32只，體重1.90-2.50千克，平均2.0±0.35千克。由廣州醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。 2．分組：按隨機(jī)方法分為4組(每組8只)：①正常對(duì)照組；②單純急性肺損傷組；③EGF對(duì)照組(單純給EGF)；④EGF治療組(急性

6、肺損傷+EGF治療)。 3．動(dòng)物模型制作方法：經(jīng)耳緣靜脈注入內(nèi)毒素LSP(脂多糖)制備成急性肺損傷的動(dòng)物模型。 4．EGF治療：在家兔內(nèi)毒素致急性肺損傷后立即進(jìn)行EGF治療。具體方法為：將兔固定，1ml注射器吸取EGF 100μg/kg，加生理鹽水稀釋至1ml，將特制針頭經(jīng)家兔聲門插入氣管，迅速把液體以霧狀噴入，回籠飼養(yǎng)。 5．觀察內(nèi)容及指標(biāo)：各組于1、12、24、48小時(shí)分批檢測(cè)動(dòng)脈血氧變化，用ELISA法測(cè)定

7、血清TNF-a、IL-6水平；處死動(dòng)物，分離肺組織，觀察病理形態(tài)變化；取右肺組織稱重，后烘干48小時(shí)致恒重，計(jì)算肺組織濕重/干重(W/D)比值。 6．統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：使用SPSS13.0 for Windows統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)表示，組間差異比較用方差齊性檢驗(yàn)(Levene法)，樣本均數(shù)之間的兩兩比較用q檢驗(yàn)。兩組均數(shù)間用非配對(duì)t檢驗(yàn)。 結(jié)論: 1．TNF-a、IL-6參與和反映了