長(zhǎng)期飲酒對(duì)內(nèi)外源性因素誘導(dǎo)急性肺損傷的影響.pdf

1、急性肺損傷（actue lung injury ALI）/急性呼吸窘迫綜合癥(acute respiratorydistress syndrome ARDS)是由心源性以外的各種肺內(nèi)外致病因素引起的急性進(jìn)行性呼吸衰竭。引起ALI/ARDS的原因可分肺內(nèi)因素和肺外因素兩種。不同因素引起的ALI/ARDS在發(fā)病機(jī)制及對(duì)治療方法反應(yīng)方面有所差異。近年的研究表明長(zhǎng)期飲酒是增加患者發(fā)生ARDS的獨(dú)立危險(xiǎn)因子，但長(zhǎng)期飲酒對(duì)內(nèi)、外源性因素導(dǎo)致的急性肺

2、損傷的影響機(jī)制是否存在差異尚不明確。為明確長(zhǎng)期飲酒對(duì)不同因素肺損傷的影響，我們首先模擬了長(zhǎng)期飲酒大鼠模型，在此基礎(chǔ)上分別予以腹腔注射和氣道滴注LPS，建立內(nèi)、外源性肺損傷動(dòng)物模型，觀察研究長(zhǎng)期飲酒對(duì)不同病因誘導(dǎo)的急性肺損傷時(shí)谷胱甘肽(glutathione，GSH)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)、丙二醛(malonaldehyde，MDA)、相關(guān)細(xì)胞因子及Src抑制的蛋白激酶C底物（Src-suppr

3、essed Ckinase substrate，SSeCKS）水平變化，比較差異，為今后治療ALI提供實(shí)踐和理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 SD雄性大鼠36只，隨機(jī)分為飲水組和飲酒組，每組18只。適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后，將飲酒組大鼠的飲水換成一定濃度的酒精作為飲水的唯一來源。首先用6％的酒精喂養(yǎng)3天，然后用10％的酒精喂養(yǎng)4天，最后用20％的酒精喂養(yǎng)5周，共喂養(yǎng)6周，建立長(zhǎng)期飲酒模型。在此基礎(chǔ)上再各自隨機(jī)分三組，分別為單純飲酒

4、組、飲酒內(nèi)源性肺損傷組、飲酒外源性肺損傷組、單純飲水組、飲水內(nèi)源性肺損傷組和飲水外源性肺損傷組，每組6只。然后分別給予腹腔注射或氣管滴注LPS15mg/kg建立內(nèi)外源性肺損傷模型。
　　 觀察各組PaO2、肺W/D值的變化，肺、肝組織的病理HE染色改變及電鏡下觀察;檢測(cè)肺肝組織GSH、MDA、SOD的變化;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)血清和肺泡灌洗液(BALF)中的TNF-α、IL-6、IL-10的水平改變;實(shí)時(shí)PCR法

5、測(cè)定肺組織SSeCKSmRNA表達(dá)變化，比較各組上述指標(biāo)是否存在差異。
　　 數(shù)據(jù)采用SSPS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。
　　 結(jié)果：
　　 1、肺損傷各組PaO2下降，肺W/D值升高;內(nèi)源性肺損傷改變較外源性肺損傷明顯;飲酒內(nèi)、外源性肺損傷改變較飲水內(nèi)外源性肺損傷更顯著。
　　 2、外觀上飲水內(nèi)源性肺損傷組雙肺充血水腫以背部為重，有散在點(diǎn)狀出血，飲水外源性肺損傷組可見雙肺彌漫性充血紅腫。飲酒內(nèi)、外源性肺損傷

6、組雙肺充血水腫更為明顯。光鏡下內(nèi)源性肺損傷組以肺泡破壞為主，伴炎性細(xì)胞浸潤(rùn);外源性肺損傷組以肺間質(zhì)改變?yōu)橹?，伴散在小血管充血和炎性?xì)胞浸潤(rùn)。飲酒肺損傷各組光鏡觀察病變程度進(jìn)一步加重。電鏡觀察可見內(nèi)源性肺損傷組肺泡Ⅱ型細(xì)胞損傷明顯，外源性肺損傷組內(nèi)皮細(xì)胞損傷明顯。
　　 3、長(zhǎng)期飲酒組較飲水組肺、肝組織GSH、SOD水平下降，MDA水平上升。肺損傷各組肺組織GSH、SOD水平明顯下降，MDA升高顯著，長(zhǎng)期飲酒損傷各組變化較飲水損傷

7、各組更加顯著。外源性肺損傷組GSH、MDA改變較內(nèi)源性肺損傷明顯。
　　 4、長(zhǎng)期飲酒組血清及BALF中TNF-α、IL-6、IL-10水平升高。長(zhǎng)期飲酒后肺損傷各組細(xì)胞因子變化均較飲水肺損傷各組顯著，其中外源性肺損傷組的血清中TNF-α、IL-10水平較內(nèi)源性肺損傷組升高明顯，BALF則以內(nèi)源性肺損傷組明顯，IL-6內(nèi)外源組差異不明顯，
　　 5、長(zhǎng)期飲酒組SSeCKSmRNA表達(dá)較飲水組升高;肺損傷各組SSeCKSm

8、RNA表達(dá)明顯增加，飲酒肺損傷各組增加更加明顯;內(nèi)、外源肺損傷組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)論：
　　 1、長(zhǎng)期飲酒可引起肝組織抗氧化物質(zhì)GSH含量下降，組織抗氧化能力減弱，脂質(zhì)過氧化增加，代謝產(chǎn)物MDA含量上升。肺臟抗氧化物質(zhì)含量也相應(yīng)下降，脂質(zhì)過氧化物含量上升，與肝臟氧化還原指標(biāo)變化呈相關(guān)性。
　　 2、長(zhǎng)期飲酒后肺損傷程度重于飲水后肺損傷，且飲酒后外源性肺損傷氧化還原指標(biāo)變化同內(nèi)源性肺損傷相比更加明顯。這一結(jié)

9、果顯示由于長(zhǎng)期飲酒已引起肺臟抗氧化物質(zhì)含量減少，當(dāng)受到致傷因素攻擊時(shí)，抗氧化物質(zhì)進(jìn)一步減少，形成惡性循環(huán)，加重了肺損傷的程度。同時(shí)因內(nèi)、外源性肺損傷對(duì)肝臟的“二次打擊”程度不同，所以氧化還原指標(biāo)在長(zhǎng)期飲酒后內(nèi)、外源因素引起肺損傷時(shí)改變程度也不相同。
　　 3、長(zhǎng)期飲酒使大鼠血清及BALF中TNF-α、IL-6、IL-10的水平升高，表明長(zhǎng)期飲酒導(dǎo)致肝臟損傷，刺激Kupffer細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等釋放炎性細(xì)胞因子增多，同時(shí)為保持炎性因

10、子和抗炎因子平衡，IL-10釋放也隨之增多。
　　 4、長(zhǎng)期飲酒后肺損傷時(shí)血清及BALF中TNF-α、IL-6、IL-10的水平進(jìn)一步升高，且在血清中以外源性損傷升高明顯，BALF中以內(nèi)源性損傷升高明顯。這表明導(dǎo)致肺損傷的途徑不同，細(xì)胞因子釋放的主要部位也隨之不同。
　　 5、長(zhǎng)期飲酒使大鼠肺組織SSeCKS表達(dá)增加，且長(zhǎng)期飲酒后肺損傷時(shí)表達(dá)更加顯著，這表明SSeCKS表達(dá)增加是長(zhǎng)期飲酒引起ARDS的易感性增加和病情嚴(yán)重