肝癌細胞上清液促進成纖維細胞表達COX-2和HGF的研究.pdf

1、目的:觀察小鼠肝癌細胞上清液對成纖維細胞轉(zhuǎn)分化、增殖的影響及環(huán)氧合酶-2(COX-2)、肝細胞生長因子(HGF)表達水平變化的影響。探討成纖維細胞是否可以用來解決移植后肝細胞長期生存率低這一難題。
　　方法:MTT法檢測普通培養(yǎng)液、含有小鼠肝癌細胞上清液的條件培養(yǎng)液以及含有轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β1)的培養(yǎng)液對成纖維細胞增殖情況的影響，用RT-PCR以及免疫組織化學(xué)法及檢測在不同培養(yǎng)液培養(yǎng)下，成纖維細胞的α-平滑肌肌動蛋白(α-S

2、MA)、COX-2及HGF的mRNA及蛋白表達情況。
　　結(jié)果:MTT法的結(jié)果顯示條件培養(yǎng)液及含TGF-β1的培養(yǎng)液對成纖維細胞增殖有一定的促進作用，但條件培養(yǎng)液的促進作用更強。RT-PCR的結(jié)果顯示條件培養(yǎng)液以及含TGF-β1的普通培養(yǎng)液比普通培養(yǎng)液更有利于成纖維細胞轉(zhuǎn)化為以α-SMA為標志的肌成纖維細胞，并能維持表型穩(wěn)定;且能促進肌成纖維細胞穩(wěn)定的表達COX-2及HGF。在第3天時α-SMA的表達達到最高峰，并在第3天后表達穩(wěn)

3、定。COX-2、HGF在第5天表達達到最高峰，并保持穩(wěn)定。但普通培養(yǎng)液中的成纖維細胞不表達COX-2、HGF。
　　結(jié)論:小鼠肝癌細胞上清液能有效、穩(wěn)定地使成纖維細胞轉(zhuǎn)分化成為穩(wěn)定表達COX-2、HGF的肌成纖維細胞。成纖維細胞只有在轉(zhuǎn)分化后才能表達COX-2、HGF，而且成纖維細胞在肝癌細胞上清液的作用下增殖明顯，表達COX-2、HGF的水平較高。以上結(jié)果為將來成纖維細胞聯(lián)合肝細胞移植來提高移植后肝細胞長期生存率奠定了理論基礎(chǔ)。