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文檔簡介
1、阿爾茨海默癥(Alzheimer's disease,AD)的一個(gè)主要病理特征是神經(jīng)元外β-amyloid(Aβ)聚集形成的淀粉樣斑,Aβ級(jí)聯(lián)假說是AD發(fā)病機(jī)制的主流學(xué)說。β-淀粉樣蛋白前體蛋白(β-Amyloid Precursor Protein,APP)經(jīng)β-分泌酶(β-site APPcleaving enzyme1,BACE1)和γ-分泌酶的順序剪切后生成大量的Aβ40和少量的Aβ42,但Aβ,特別是Aβ42具有神經(jīng)毒性,可以
2、導(dǎo)致神經(jīng)退行死亡。BACE1是APP水解的限速酶。我們實(shí)驗(yàn)室之前的研究發(fā)現(xiàn)人源銅相關(guān)蛋白(CutAdivalent cation tolerance homolog of E.coli,CUTA)通過與BACE1的相互作用,介導(dǎo)其在胞內(nèi)的定位,從而調(diào)控APP的水解途徑和Aβ的生成。哺乳動(dòng)物的CUTA可能參與銅的調(diào)控,而金屬離子銅在AD的發(fā)病過程中也起著重要作用。因此,對(duì)于CUTA的功能研究,將有助于揭示AD的致病機(jī)理。
本研究
3、中,我們應(yīng)用TALEN技術(shù)構(gòu)建了Cuta基因敲除小鼠。該小鼠缺失8個(gè)蛋白編碼堿基,導(dǎo)致移碼突變。我們建立了應(yīng)用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定Cuta基因敲除小鼠的方法。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)純合的Cuta基因敲除小鼠可以存活,而且其出生率符合孟德爾遺傳定律,性別比例平衡,并且體重?zé)o明顯改變。我們對(duì)三月齡Cuta基因敲除小鼠與認(rèn)知記憶和情緒相關(guān)的行為學(xué)進(jìn)行了研究,包括曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、Y迷宮、高架十字迷宮、強(qiáng)迫游泳等,但沒有發(fā)現(xiàn)Cuta基因敲除對(duì)小鼠行為有
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