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1、本文構(gòu)建了用于防治的HSV-2的DNA疫苗并將其接種C57/BL6小鼠觀察免疫效果，通過觀察一系列體液免疫和細(xì)胞免疫指標(biāo)以便進(jìn)一步研究DNA疫苗的免疫機制。以往HSV-2DNA疫苗的構(gòu)建主要集中于病毒免疫原形最強的糖蛋白D區(qū)段，實踐表明它并不是最有效的。綜合考慮到病毒入侵和復(fù)制整個生理過程，構(gòu)建了gB、gC、gD和即刻早期蛋白ICP27多表位復(fù)合疫苗，此外還此基礎(chǔ)上對其進(jìn)一步修飾，分別在DNA復(fù)合疫苗上引入信號肽基因和泛素基因，以期能有
2、效防止HSV-2的感染。另一方面為了提高免疫活性和保護能力，嘗試著將復(fù)合疫苗質(zhì)粒與佐劑IL2質(zhì)粒通過一定比例的陽離子脂質(zhì)體包裹共表達(dá)于小鼠體內(nèi)免疫。通過與陰性對照組比較檢測到了高效價的特異性IgG抗體，高水平的特異性T淋巴細(xì)胞殺傷率和增殖率以及高濃度的細(xì)胞因子IL2，IFN-γ量。 以完整EST為參考序列設(shè)計引物，以人的胎腦cDNA為模板，用PCR方法篩選獲得rab26基因全長序列，并亞克隆到克隆載體pGEM-T，真核表達(dá)載體pEG
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