甘草次酸對(duì)表皮生長因子誘導(dǎo)的晶狀體上皮細(xì)胞增殖信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的影響.pdf

1、目的:研究甘草次酸（GA）對(duì)體外培養(yǎng)的人晶狀體上皮細(xì)胞生長的影響，以及對(duì)重組人表皮生長因子（rhEGF）誘導(dǎo)的人晶狀體上皮細(xì)胞（LECs）內(nèi)環(huán)磷酸腺苷（cAMP）、環(huán)磷酸鳥苷（cGMP）的影響及其機(jī)理。 方法:體外培養(yǎng)人晶狀體上皮細(xì)胞株SR01/04，將培養(yǎng)的第3代細(xì)胞分為五組。A組為實(shí)驗(yàn)組：培養(yǎng)液+LECs+rhEGF+GA，根據(jù)GA不同濃度（7.5μmol/L，15μmol/L，30μmol/L），分為A1，A2，A3組；B

2、組為增殖組：培養(yǎng)液+LECs+rhEGF；C組為對(duì)照組：培養(yǎng)液+LECs。取第3代LEC在96孔板中培養(yǎng)24小時(shí)后，在光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變；用MTT測(cè)定法觀察GA對(duì)LECs增殖的影響；用放射免疫分析法檢測(cè)各組LECs內(nèi)cAMP和cGMP含量，并進(jìn)行比較。 結(jié)果: 1.各組LECs形態(tài)學(xué)觀察（光鏡）：（1）增殖組及對(duì)照組LEC細(xì)胞均增加，增殖組細(xì)胞數(shù)量較對(duì)照組多。（2）實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞密度較增殖組明顯降低，漂浮細(xì)胞較增殖組多

3、。（3）A1與A2相比較，細(xì)胞密度及漂浮細(xì)胞數(shù)量無明顯差別，A3組內(nèi)細(xì)胞密度較A1及A2組明顯降低，漂浮細(xì)胞數(shù)量較A1及A2組明顯增加。 2.GA對(duì)LECs增殖的作用：（1）對(duì)照組、增殖組及藥物組（A1，A2，A3）吸光值依次分別為，0.492±0.090，0.799±0.025，0.649±0.011，0.471±0.020，0.345±0.077。（2）各組間兩兩比較，除C組與A2組比較差異無顯著性（P>0.05），其余各組

4、間比較差異均有顯著性（P<0.01）。（3）GA抑制LECs增殖，半數(shù)抑制量（24小時(shí)）為34.509μmol/L。 3.各組LECs內(nèi)cAMP的濃度及比較：（1）增殖組LECs內(nèi)cAMP濃度為1.079±0.191pmol/mL，對(duì)照組為1.783±0.150pmol/mL，兩組比較有顯著差異性的（P<0.01）；（2）不同濃度的GA組（7.5μmol/L，15μmol/L，30μmol/L）LECs內(nèi)cAMP濃度依次為1.4

5、06±0.104pmol/mL，1.892±0.223pmol/mL，2.441±0.418pmol/mL，分別與增殖組進(jìn)行兩兩比較，均有顯著差異（P<0.01）；（3）不同濃度GA組LEC內(nèi)cAMP濃度的組間兩兩比較，均有顯著性差異（P<0.01）；（4）對(duì)照組分別與3個(gè)不同藥物濃度組A1，A2，A3組LECs內(nèi)cAMP濃度比較：C組分別與A1，A3組比較，有顯著差異（P<0.01），與A2組比較，無顯著差異（P>0.05）。

6、 4.各組LECs內(nèi)cGMP的濃度及比較：（1）增殖組LECs內(nèi)cGMP濃度為0.175±0.021pmol/mL，對(duì)照組為0.118±0.016pmol/mL，兩組比較是有顯著差異性的（P<0.01）；（2）不同濃度的GA組（7.5μmol/L，15μmol/L，30μmol/L）LECs內(nèi)cGMP濃度依次為0.136±0.006pmol/mL，0.107±0.005pmol/mL，0.078±0.007pmol/mL，分別與增殖組進(jìn)

7、行兩兩比較，均有顯著差異（P<0.01）；（3）不同濃度GA組LECs內(nèi)cGMP濃度的組間兩兩比較，均有顯著性差異（P<0.01）。（4）對(duì)照組分別與3個(gè)不同藥物濃度組A1，A2，A3組LECs內(nèi)cGMP濃度比較：C組分別與A1，A3組比較，有顯著差異（P<0.01），與A2組比較，無顯著差異（P>0.05）。 結(jié)論: 1.rhEGF能促進(jìn)LECs的增殖。 2.GA能升高LECs內(nèi)cAMP濃度，降低LECs內(nèi)cG