白藜蘆醇甲基化衍生物對(duì)TNF-α誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷的炎癥介質(zhì)及NF-κB的影響.pdf

1、動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)是由多種病因造成的始發(fā)于動(dòng)脈壁內(nèi)膜的一系列復(fù)雜分子和細(xì)胞改變的總結(jié)果，也是誘發(fā)一些諸如冠心病、心肌梗塞、腦梗塞等心腦血管疾病的主要原因。隨著人們生活方式的改變，由于AS病變引起的心腦血管疾病已經(jīng)成為全球第一位的死亡原因，因此對(duì)于AS發(fā)病機(jī)制的研究一直是心血管疾病研究的熱點(diǎn)。AS發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，尚未完全清楚，目前認(rèn)為存在多種學(xué)說(shuō)，如脂質(zhì)浸潤(rùn)學(xué)說(shuō)、中層平滑肌細(xì)胞增生學(xué)說(shuō)、血栓源學(xué)說(shuō)以及血

2、流動(dòng)力學(xué)學(xué)說(shuō)等，但是這些都不能對(duì)．AS的發(fā)生提供滿意的解釋。 近年來(lái)對(duì)于AS炎癥學(xué)說(shuō)這一機(jī)制的研究深受關(guān)注，認(rèn)為炎癥反應(yīng)貫穿于AS始終，在AS的發(fā)生發(fā)展中起著非常重要的作用。1999年Ross教授提出AS病變是一種動(dòng)脈血管的慢性炎癥，各種危險(xiǎn)因素都是通過(guò)誘導(dǎo)動(dòng)脈炎癥反應(yīng)而引發(fā)AS的，因此抑制炎癥反應(yīng)是改善AS病變的重要措施。大量的研究已經(jīng)證實(shí)，微生物感染、氧化型低密度脂蛋白、細(xì)胞因子等因素可誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化形成過(guò)程中的早期炎癥

3、反應(yīng)。血管壁的炎癥最初是對(duì)血管損傷的保護(hù)機(jī)制，通過(guò)炎性細(xì)胞如單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞增生保持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。但如果炎癥未能及時(shí)消除則會(huì)對(duì)組織造成破壞而引起炎性纖維增生反應(yīng)及脂質(zhì)的沉積，從而導(dǎo)致AS。大量研究表明動(dòng)脈粥樣硬化早期炎癥病變的形成中最為重要的一個(gè)環(huán)節(jié)就是循環(huán)中單核細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞的聚集和跨內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)移，從而使內(nèi)皮細(xì)胞通過(guò)分泌炎癥介質(zhì)或調(diào)節(jié)白細(xì)胞在其表面的黏附而具備潛在的炎癥作用，因而在引發(fā)和擴(kuò)大動(dòng)脈的炎癥反應(yīng)中起著關(guān)鍵的作用。核

4、轉(zhuǎn)錄因子NF-κB是血管炎性過(guò)程中的中心轉(zhuǎn)錄控制點(diǎn)，以NF-κB轉(zhuǎn)錄因子家族為調(diào)控中心的內(nèi)皮細(xì)胞活化及炎癥基因誘導(dǎo)途徑有可能成為有關(guān)危險(xiǎn)因子促動(dòng)脈粥樣硬化形成的共同途徑。同時(shí)在各種環(huán)境因素刺激下發(fā)生內(nèi)皮細(xì)胞活化和功能紊亂又是啟動(dòng)動(dòng)脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)的主要原因。 因此，研究藥物對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響，并探討其作用的分子機(jī)制可能是抗AS治療的新靶點(diǎn)，也可為開(kāi)發(fā)干預(yù)內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)的抗AS新藥提供一條新思路。白藜蘆醇(Rersve

5、ratrol，RSV)，化學(xué)名為反式3,4′,5-三羥基二苯乙烯(3，4′，5-trihydroxystilbene)，屬于多酚類化合物，是葡萄屬植物產(chǎn)生的一種植物抗毒素，廣泛存在于葡萄、中藥虎杖等多種植物中。大量研究已經(jīng)證實(shí)：白藜蘆醇具有多種藥理效應(yīng)如抗癌、抗衰老、抗炎、神經(jīng)保護(hù)以及良好的心血管保護(hù)作用，并且認(rèn)為其在抗動(dòng)脈粥樣硬化中具有很重要的作用。這一作用主要與其具有抗氧化和抗炎特性有關(guān)，而這一抗炎機(jī)制主要在于抑制轉(zhuǎn)錄因子NF-κB

6、和AP-1的活化，從而抑制炎癥相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)。 近年來(lái)，隨著白藜蘆醇衍生物的不斷出現(xiàn)，研究者們發(fā)現(xiàn)其具有與白藜蘆醇相似的藥理活性，其中某些化合物的活性、選擇性及穩(wěn)定性均要強(qiáng)于白藜蘆醇，因而成為近年來(lái)研究的熱點(diǎn)。目前報(bào)道較多的是白藜蘆醇的甲基化衍生物，有研究發(fā)現(xiàn)甲基化白藜蘆醇(TMS，trans-3，5，4′-trimethoxystilbene)具有很強(qiáng)的抗血管生成作用，且藥理活性是白藜蘆醇的30-100倍，并具有很強(qiáng)的

7、血管靶向性。VEGF-R轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)胚胎實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)低濃度TMS(0.1 μM)可明顯抑制新生血管的生成。在大鼠嗜堿性白血病粒細(xì)胞(RBL-2H3)和外周血單核細(xì)胞的研究中還發(fā)現(xiàn)TMS可抑制一些細(xì)胞因子和組織因子的表達(dá)，且效果比白藜蘆醇作用都要強(qiáng)。在我們前期的預(yù)實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)TMS較白藜蘆醇有更好的抗黏附能力，但目前有關(guān)白藜蘆醇甲基化衍生物保護(hù)血管內(nèi)皮、抑制炎癥介質(zhì)以抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用與機(jī)制的研究尚未見(jiàn)報(bào)道?；谏鲜鲅芯?，本實(shí)驗(yàn)以動(dòng)脈粥樣

8、硬化發(fā)病中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)---內(nèi)皮損傷及單核與內(nèi)皮細(xì)胞黏附作為切入點(diǎn)，利用培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株，建立腫瘤壞死因子(TNF-α)誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型，觀察白藜蘆醇甲基化衍生物對(duì)單核一內(nèi)皮細(xì)胞粘附的抑制作用，并從細(xì)胞粘附分子等炎癥介質(zhì)及其NF-κB信號(hào)通路初步探討白藜蘆醇甲基化衍生物保護(hù)血管內(nèi)皮、抗動(dòng)脈粥樣硬化的炎性反應(yīng)分子機(jī)制，為下一步體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的深入研究打下基礎(chǔ)。本研究的目的是觀察白藜蘆醇甲基化衍生物與對(duì)腫瘤壞死因子(TNF-α)