IFN-α-1b對(duì)TNF-α誘導(dǎo)NF-κB活性及EJ細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的:探討聯(lián)合使用TNF-α、IFN-α-1b對(duì)抗凋亡因子NF-κ B及其抑制因子Ⅰκ B-α的影響，同時(shí)研究聯(lián)合或者單獨(dú)使用TNF-α、IFN-α-1b對(duì)膀胱癌細(xì)胞系EJ細(xì)胞的細(xì)胞毒效應(yīng)。 方法:應(yīng)用Western blot蛋白印跡法去檢測(cè)Ⅰκ B-α在不同時(shí)間段細(xì)胞內(nèi)濃度變化。應(yīng)用激光掃描共聚焦(CLSM)對(duì)NF-κ B p65進(jìn)行定位顯示。應(yīng)用改良MTT比色法去檢測(cè)EJ細(xì)胞的存活狀態(tài)。 結(jié)果:單獨(dú)使用IFN-α-1

2、b組和IFN-α-1b聯(lián)合TNF-α組之間對(duì)EJ細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率的比較有非常顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.001)；單獨(dú)使用TNF-α組和TNF-α聯(lián)合IFN-α-1b組之間有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.022)。在兩種聯(lián)合作用情況下均可明顯提高EJ細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率，但以40ng/ml的TNF-α加入2ng/ml的IFN-α-1b時(shí)對(duì)EJ細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用最明顯。ⅠκB-α在TNF-α誘導(dǎo)下隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，其細(xì)胞內(nèi)含量呈下降趨勢(shì)：NF-κB p65

3、成相反表達(dá)。加用IFN-α-1b后可翻轉(zhuǎn)二者的表達(dá)情況。 結(jié)論: IFN-α-1b抑制TNF-α誘導(dǎo)下的NF-κB活性表達(dá)并增強(qiáng)TNF-α對(duì)膀胱癌EJ細(xì)胞株的細(xì)胞毒效應(yīng)。大劑量、長(zhǎng)時(shí)間使用TNF-α后，其抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的作用占優(yōu)勢(shì)。聯(lián)合使用TNF-α和IFN-α-1b時(shí)可明顯提高EJ細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率，這和IFN-α-1b阻斷NF-κB活性釋放，增強(qiáng)TNF-α促細(xì)胞凋亡作用有關(guān)。應(yīng)該引起注意的是聯(lián)用TNF-α和IFN-α-1b抑制E