小鼠Stat3-5基因座的克隆及Stat5a-b條件性基因敲除小鼠的制備.pdf_第1頁(yè)
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1、為了制備Stat5a/b條件性基因敲除小鼠,并全面了解Stat3/5基因座的其它基因是否參與乳腺發(fā)育和乳腺腫瘤的發(fā)生,我們首先利用Stat5a、Stat5b、和Stat3的cDNA探針與小鼠BAC文庫(kù)雜交,得到了兩個(gè)BAC克隆,覆蓋Stat5a/b基因座500kb的DNA序列,將其測(cè)序后通過(guò)BLAST(nrsearch)軟件在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中搜索分布于其上的已知基因.為了了解敲除Stat5a/b基因后是否會(huì)影響基因座內(nèi)其它基因的表達(dá),我

2、們分析了這9個(gè)已知基因在小鼠各個(gè)組織中的表達(dá)情況.在得到Stat5a/b基因敲除的小鼠后,我們?cè)俜治龃嘶蜃鶅?nèi)的各基因表達(dá)情況,以確定得到的小鼠表型是Stat5a/b基因失活的結(jié)果,而不是其鄰近基因表達(dá)差異引起的.結(jié)論:1該實(shí)驗(yàn)首次克隆并測(cè)序了Stat3/5基因座,同時(shí)對(duì)位于基因座內(nèi)的9個(gè)已知基因在小鼠不同組織的表達(dá)情況進(jìn)行了分析.2發(fā)現(xiàn)了兩個(gè)新基因,命名為D11Lgp1(Lgp1)和D11Lgp2(Lgp2),分析了其細(xì)胞內(nèi)定位,并對(duì)

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