UT-B基因敲除小鼠免疫功能的研究.pdf

1、本研究以尿素通道蛋白B(Urea Transporter B，UT-B)基因敲除小鼠(UT-B-/-)和UT-B野生型小鼠(WT)為實驗對象，探討UT-B基因對小鼠免疫功能的影響。采用基因鑒定法篩選UT-B基因敲除小鼠和UT-B野生型小鼠70只，分兩組進行試驗。第一組各取UT-B基因敲除小鼠和UT-B野生型小鼠15只，分別用于檢測脾臟UT-B蛋白的表達、免疫器官指數(shù)的測定、小鼠脾臟淋巴細胞轉化實驗以及流式分析脾臟和外周血中淋巴細胞分群情

2、況。第二組取UT-B基因敲除小鼠和UT-B野生型小鼠各20只進行荷瘤試驗和腫瘤組織形態(tài)學觀察。
　　 蛋白免疫印跡(Western-blot)試驗結果表明，UT-B基因敲除小鼠脾臟不表達UT-B蛋白，UT-B野生型小鼠脾臟表達分子量為41-54KD的UT-B蛋白。脾臟指數(shù)檢測得出UT-B基因敲除小鼠脾臟指數(shù)為2.76，UT-B野生型小鼠脾臟指數(shù)為3.71，UT-B基因敲除小鼠脾臟指數(shù)顯著低于UT-B野生型小鼠(P＜0.01)。脾

3、臟淋巴細胞轉化實驗中刀豆蛋白A(ConA)刺激的UT-B基因敲除小鼠和UT-B野生型小鼠的脾臟淋巴細胞轉化率分別為2.7和1.8(P＜0.01);脂多糖(LPS)刺激的UT-B基因敲除小鼠和UT-B野生型小鼠的脾臟淋巴細胞轉化率分別為3.62和3.22(P＜0.01);UT-B基因敲除小鼠脾臟淋巴細胞轉化率顯著高于UT-B野生型小鼠(P＜0.01)。流式檢測結果表明，UT-B基因敲除小鼠的CD4+T細胞，CD8+T細胞數(shù)量分別比野生型小

4、鼠多15.18％(P＜0.01)和3.16％(P＞0.05)，UT-B基因敲除小鼠B細胞數(shù)量低于WT小鼠（P＞0.05）。負荷前列腺腫瘤試驗的抑瘤率為55.1％，UT-B基因敲除小鼠和UT-B野生型小鼠荷瘤后脾臟指數(shù)分別為4.7和4.3，兩者相比差異不顯著(P＞0.05);UT-B基因敲除小鼠荷瘤后脾臟和外周血中CD4+T和T細胞數(shù)量分別比UT-B野生型小鼠高30.71％(P＜0.01)和37.45％(P＜0.01)。腫瘤組織石蠟切片H

5、E染色形態(tài)學觀察結果顯示UT-B野生型荷瘤小鼠腫瘤組織石蠟切片中腫瘤細胞排列緊密，壞死較少、異型性明顯、壞死區(qū)少量淋巴細胞浸潤;UT-B基因敲除荷瘤小鼠腫瘤組織石蠟切片中腫瘤細胞排列紊亂，壞死較多，異型性不明顯，癌細胞核固縮，壞死區(qū)有大量淋巴細胞浸潤。
　　 以上結果可以得出如下推斷:UT-B基因的敲除增加了小鼠脾臟和外周血中發(fā)揮免疫功能的CD4+T細胞和T細胞的數(shù)量，增強了小鼠的細胞免疫功能，起到抑制腫瘤的作用;UT-B基因與