Sirt-1和HO-1參與白黎蘆醇對(duì)長(zhǎng)時(shí)程低溫保存心臟的保護(hù)作用.pdf

1、目的:
　　采用離體心臟灌流模型，研究長(zhǎng)時(shí)程低溫保存對(duì)心臟的損傷作用，及白藜蘆醇(RES)對(duì)長(zhǎng)時(shí)程低溫保存心臟的保護(hù)作用及其機(jī)制。
　　方法:
　　SPF級(jí)健康成年雄性SD大鼠42只，隨機(jī)分成7組，包括空白對(duì)照組（control組），單純9h低溫保存組（9h組），白藜蘆醇組(3μM、10μM、30μMRES組)，尼克酰胺組（NAM組:保存液中加入Sirt-1抑制劑尼克酰胺NAM40μmol/L），白藜蘆醇+尼克酰胺組（

2、RES+NAM組:保存液中加入30μ mol/L RES和40μmol/L NAM）。采用Langendorff離體心臟灌注裝置，經(jīng)主動(dòng)脈進(jìn)行逆行灌注30 min后，改用4℃的Celsior液灌注，待心臟停搏后，各組心臟在4℃條件下不同Celsior心肌保存液中分別保存9h后取出，建立大鼠心臟低溫保存模型。用HE染色的方法觀察心肌細(xì)胞在各組中的形態(tài)學(xué)變化情況;用RT-PCR方法和Western blotting方法檢測(cè)Sirt-1和HO

3、-1基因和蛋白在各組中的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　(1) RES對(duì)長(zhǎng)時(shí)程低溫保存心肌細(xì)胞的保護(hù)作用與control組相比，9h組HE染色心肌細(xì)胞損傷明顯，3μM、10μ M、30μ MRES組與9h組相比心肌細(xì)胞損傷逐漸減輕;
　　(2) RES對(duì)Sirt-1的激活作用與control組相比，9h組Sirt-1表達(dá)明顯下降(P＜0.01)，3μ M、10μ M、30μ MRES組與9h組相比Sirt-1表達(dá)水平呈劑量依賴

4、性升高(P＜0.05);
　　(3) RES對(duì)HO-1的上調(diào)作用與control組相比，9h組HO-1表達(dá)明顯下降(P＜0.01)，3μ M、10μM、30μ M RES組與9h組相比HO-1表達(dá)水平呈劑量依賴性升高(P＜0.01);
　　(4) NAM取消RES對(duì)Sirt-1的激活NAM組Sirt-1的表達(dá)最低，RES+NAM組Sirt-1表達(dá)比30μMRES組明顯降低(P＜0.01);
　　(5)Sirt-1和HO

5、-1在RES長(zhǎng)時(shí)程低溫保存心肌細(xì)胞保護(hù)作用中的地位與9h組相比，3μ M、10μM、30μ M RES組Sirt-1和HO-1表達(dá)升高的同時(shí)心肌細(xì)胞損傷也逐漸減輕，Sirt-1的抑制劑NAM可取消RES對(duì)Sirt-1表達(dá)的上調(diào)，同時(shí)HO-1表達(dá)也下降，取消了RES的心肌細(xì)胞保護(hù)作用。
　　結(jié)論:
　　(1)長(zhǎng)時(shí)程低溫保存誘發(fā)心肌細(xì)胞損傷明顯，RES對(duì)其具有顯著改善作用;
　　(2) RES誘導(dǎo)Sirt-1和HO-1表達(dá)