磁性納米四氧化三鐵協(xié)同化療藥物及5-溴漢防己甲素在荷瘤鼠體內(nèi)逆轉(zhuǎn)耐藥研究.pdf

1、目的:本課題旨在建立惡性血液病多藥耐藥（MDR）的動物實驗?zāi)Ｐ停接懘判约{米四氧化三鐵（Fe3O4-MNPs）協(xié)同5-溴漢防己甲素（BrTet）及化療藥物在動物模型體內(nèi)逆轉(zhuǎn)耐藥的作用，研究逆轉(zhuǎn)多藥耐藥的作用機理，為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 方法:1）建立惡性血液病多藥耐藥的動物模型：將具有典型MDR表型的K562/A02以及其親本K562細胞分別接種于BALB/C裸鼠背側(cè)皮下，接種細胞數(shù)為1×107細胞/只，利用小動物彩超確定腫瘤

2、的形成。2）當腫瘤大小達75-150 mm3時，將其隨機分為五組用藥，（每組包括耐藥荷瘤鼠和敏感荷瘤鼠各半）A組生理鹽水0．2ml/天；B組單用柔紅霉素（DNR）1mg/kg；C組Fe3O4-MNPs聚合DNR0．63mg/kg，；D組BrTet2．5mg/kg+DNR1mg/kg；E組Fe3O4-MNPs聚合DNR0．63mg/kg和BrTet2．5mg/kg。用藥期間觀察各組腫瘤成瘤率，生長特征，腫瘤重量、體積等特征。3）計算實驗各

3、組相對腫瘤體積，腫瘤抑制率以及重量抑制率。4）用藥十天后處死動物，取各組腫瘤以及心、腎等臟器行組織病理學觀察。5）使用實時定量聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）以及免疫蛋白印跡試驗（western blot）檢測耐藥腫瘤凋亡相關(guān)基因以及蛋白的表達。 結(jié)果:1）敏感腫瘤細胞以及耐藥腫瘤細胞成瘤率均為100％；2）對于K562移植瘤，B、C、D、E四組之間腫瘤抑制率差異無顯著性。對于K562/A02移植瘤，F(xiàn)e3O4-MNPs協(xié)同DNR、

4、BrTet可明顯抑制移植瘤的增殖：處死時移植瘤體積為415．47±14．61mm3；相對腫瘤體積為4．88±0．11，腫瘤抑制率為（62．27±0．48）％，而單用DNR組的腫瘤抑制率僅為（3．67±0．08）％；3）同時腫瘤組織病理觀察顯示E組腫瘤細胞死亡明顯，各實驗組心腎脾等臟器無明顯病理改變；4）Fe3O4-MNPs協(xié)同DNR和BrTet能夠下調(diào)Bcl-2蛋白的表達，上調(diào)Bax、Caspase-3蛋白的表達，Real-time R