耳蝸微循環(huán)體外細(xì)胞模型的建立及鉀通道TREK-1的表達(dá).pdf

1、廣西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文耳蝸微循環(huán)體外細(xì)胞模型的建立及鉀通道TREK-1的表達(dá)姓名：韋嘉章申請學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：耳鼻咽喉頭頸外科指導(dǎo)教師：蘇紀(jì)平20090501堡圭嬰塞生堂垡迨塞 里塑塑絲至堡叢塑墮堡型塑蕉宴壟塑望鱟型墜! 笪室壟E S T A B L I S H M E N T O F A N I N ．V I T R O C E L L M O D E LO F C O C H L E A R M I C R O C I R C

2、U I A T I O N A N DP O T A S S I U M C H A N N E L T R E K ．1 E X P R E S S I O NO b j e c t i v e T o e s t a b l i s ha ni n —v i t r oc e l lm o d e l o f c o c h l e a rm i c r o c i r c u l a t i o n ，i n v e s t i

3、g a t e e x p r e s s i o n o fm e c h a n o s e n s i t i v ep o t a s s i u mc h a n n e l T R E K 一1 i nt h i si n - v i t r oc e l lm o d e l ， e x p l o r et h e f u n c t i o na n ds i g n i f i c a n c eo fT R E K

4、 - 1i nr e g u l a t i o n o fl o c a l b l o o d f l o w i n c o c h l e a ．M e t h o d s E n d o t h e l i a l c e l l s w e r ep r i m a r y c u l t u r e d f r o m s t r i a v a s c u l a r i s o f r a t c o c h l e

5、a ．A f t e r p a s s a g e a n dp u r i f i c a t i o n ，t h ei m m u n o c y t o c h e m i s t r yw a se m p l o y e dt oc l a s s i f yc e l lt y p e sb ye x a m i n i n gt h em a r k e da n t i g e no fe n d o t h e l

6、 i a lc e l l s ．T h ee x p r e s s i o no fT R E K - 1w a sd e t e c t e db y r e v e r s et r a n s c r i p t i o n —p o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n ( R T - P C R ) a n di m m u n o f l u o r e s c e n c e

7、i n t h e s ec u l t u r e dc e l l s ．R e s u l t s 1 、A f t e rp a s s a g ea n dp u r i f i c a t i o n ，t h e c u l t u r e d c e l l s s h o w e d t y p i c a l “f l a g s t o n e ’’a p p e a r a n c e a se n d o t

8、h e l i a lc e l l s ．A c c o r d i n gt o i m m u n o c y t o c h e m i s c a ld e t e c t i o no ff a c t o rV 1 ] ，w e o b s e r v e dt h a t t h e c u l t u r e d c e l l ss h o wp o s i t i v e r e a c t i o n ．2 、T

9、 h eT R E K 一1c D N A w a ss p e c i f i c a l l ya m p l i f i e db yR T - P C R ，t h ei m m u n o f l u o r e s c e n c ew h i c hw a sp e r f o r m e dt od e t e c tT R E K 一1p r o t e i ne x p r e s s i o ns h o w e

10、dp o s i t i v er e a c t i o n ．C o n c l u s i o n T h em e t h o du s e di nt h i ss t u d yc a no b t a i ne n d o t h e l i a l c e l l so ft h es t r i a v a s c u l a r i s ．w h i c h c a n b e u s e d a s a n i n