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1、該課題從以下四個(gè)方面逐步探討了特異性電壓依賴性鉀通道亞型作為治療AD等認(rèn)知功能障礙疾病新靶點(diǎn)的可能性.應(yīng)用膜片鉗全細(xì)胞記錄模式觀察大鼠海馬電壓依賴性鉀電流的發(fā)育變化;在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步研究了兩種膽堿能損傷模型海馬和新皮層錐體神經(jīng)元電壓依賴性鉀電流的變化,明確在膽堿能損傷導(dǎo)致的認(rèn)知功能障礙的病理狀態(tài)下電壓依賴性鉀電流的改變;應(yīng)用單細(xì)胞逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(single cell RT-PCR)與全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)結(jié)合以明確膽堿能損傷后可能
2、發(fā)生變化的鉀通道亞型,并闡述特異鉀通道亞型的變化與學(xué)習(xí)記憶損傷之間的關(guān)系;隨后,通過研究膽堿酯酶抑制劑(Donepezil)治療改善膽堿能損傷所致的學(xué)習(xí)記憶障礙后電壓依賴性鉀電流的變化來(lái)探討認(rèn)知功能改善與鉀通道功能的關(guān)系,并通過離體急性給藥研究不同濃度的Donepezil對(duì)海馬和新皮層錐體神經(jīng)元電壓依賴性鉀電流的直接作用,更深入地探討Donepezil改善認(rèn)知功能障礙與鉀通道的關(guān)系.該研究結(jié)合行為學(xué)實(shí)驗(yàn)、膜片鉗和單細(xì)胞RT-PCR技術(shù)研
3、究了海馬和新皮層錐體神經(jīng)元電壓依賴性鉀通道的特征及其與中樞膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)功能之間的關(guān)系.結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩種膽堿能損傷模型導(dǎo)致的認(rèn)知功能障礙都伴有海馬和新皮層I<,k>的增加和通道動(dòng)力學(xué)的異常改變,提示中樞膽堿能損傷性學(xué)習(xí)記憶障礙可能與海馬和新皮層錐體神經(jīng)元I<,k>的增加有關(guān),Kv2.1通道亞型的表達(dá)增加可能是海馬錐體神經(jīng)元I<,k>增加以及與此相關(guān)的神經(jīng)元興奮性降低和認(rèn)知功能障礙的基礎(chǔ).Donepezil改善膽堿能損傷大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能的機(jī)
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