缺氧增強(qiáng)人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞株SHI-1細(xì)胞化療敏感性及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討氯化鈷(Cobalt Chloride，CoCl2)模擬化學(xué)性缺氧條件下人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞株SHI-1化療敏感性的改變及其機(jī)制。
　　 方法：采用CoCl2 100mmol/L模擬化學(xué)性缺氧條件。四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法測(cè)定不同時(shí)間缺氧條件下，不同濃度的兩種化療藥物阿霉素和依托泊苷(VP-16)對(duì)SHI-1細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用。應(yīng)用流式細(xì)胞儀Annexin V/FITC，碘化丙啶(PI)雙標(biāo)法檢測(cè)缺氧對(duì)VP-16誘導(dǎo)

2、SHI-1細(xì)胞凋亡的影響。實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)缺氧信號(hào)傳導(dǎo)通路中的六種基因FAK、AKT、ERK、HIF-1α、Bcl-2及Bax的表達(dá)變化。觀察這些基因變化與缺氧條件下SHI-1細(xì)胞化療敏感性改變之間的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：①缺氧對(duì)SHI-1細(xì)胞增殖有抑制作用，并隨著缺氧時(shí)間延長(zhǎng)對(duì)SHI-1細(xì)胞增殖的抑制率逐漸增加，各組之間差異有顯著性(P＜0.01)。缺氧條件下，阿霉素及VP-16對(duì)SHI-1細(xì)胞的殺傷作用增強(qiáng)(P＜0.0

3、5)。②缺氧能明顯促進(jìn)SHI-1細(xì)胞的凋亡，還能使VP-16誘導(dǎo)SHI-1細(xì)胞凋亡率提高(P＜0.05)。③與對(duì)照組相比，缺氧組HIF-1α﹑FAK﹑AKT﹑ERK﹑Bcl-2﹑Bax mRNA表達(dá)量均有不同程度提高(P＜0.05)，其中Bax/Bcl-2比值明顯升高。與阿霉素組相比，缺氧+阿霉素組HIF-1α、AKT、Bax mRNA表達(dá)量有不同程度提高(P＜0.05)，F(xiàn)AK、ERK和Bcl-2兩組間變化不明顯；與VP-16組相比，

4、缺氧+VP-16組ERK、HIF-1α、Bax mRNA表達(dá)量有不同程度提高(P＜0.05)，F(xiàn)AK、AKT和Bcl-2兩組間變化不明顯。
　　 結(jié)論：CoCl2模擬的化學(xué)性缺氧可以抑制SHI-1細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)其凋亡，且能提高SHI-1細(xì)胞對(duì)阿霉素及VP-16的敏感性?？赡軝C(jī)制在于：缺氧在AKT或ERK信號(hào)傳導(dǎo)通路介導(dǎo)下使SHI-1細(xì)胞內(nèi)HIF-1α表達(dá)上調(diào)，進(jìn)而引起B(yǎng)ax和Bcl-2表達(dá)失衡，Bax/Bcl-2比值升高，最終導(dǎo)