硼替佐米增加耐藥白血病細胞株K562-DNR對化療藥物敏感性的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、白血病細胞對化療藥物的不敏感或耐藥是導致化療失敗及預后不良的重要原因,因此如何逆轉耐藥性成為眾多研究者研究的熱門話題。硼替佐米(bortezomib)是新型蛋白酶體抑制劑類藥物,細胞實驗發(fā)現其對多種腫瘤細胞有誘導調亡的作用,目前臨床被應用于治療復發(fā)及難治性多發(fā)性骨髓瘤。我們應用硼替佐米與柔紅霉素(DNR)及表柔比星聯(lián)合作用,觀察其對耐藥白血病細胞株K562/DNR的影響,探討硼替佐米的逆轉耐藥作用。 目的: 觀察蛋白酶體

2、抑制劑硼替佐米與常規(guī)化療藥物聯(lián)合作用是否增加耐藥白血病細胞株:K562/DNR對化療藥物的敏感性。 方法: 1、細胞培養(yǎng):K562/S,K562/DNR 細胞使用含有12%胎牛血清,100 U/ml的青霉素和100ug/ml鏈霉素的RPMI-1640培養(yǎng)液,在37℃、5%CO2、飽和濕度條件下培養(yǎng)。細胞經多次傳代后至指數生長期進行實驗。 2、MTT法測定硼替佐米的細胞毒性:不同濃度的硼替佐米作用于K562/DNR

3、細胞株,藥物對細胞生長抑制率%=1-實驗孔A值/對照孔A值×100%,根據線性回歸方程求得10%的細胞生長受到抑制所需藥物濃度IC10。選取低于IC10的一個濃度,作為硼替佐米試驗濃度,測定其與化療藥物聯(lián)合應用對K562/DNR細胞生長的抑制作用。 3、MTT法測定硼替佐米逆轉耐藥倍數:實驗分組:1組K562/DNR+表柔比星;2 組 K562/DNR+表柔比星+硼替佐米;3 組 K562/DNR十柔紅霉素;4組K562/DNR

4、+柔紅霉素+硼替佐米。取每組藥液以10 ul/孔置于96孔酶標板中,檢測每孔的吸收度A值。逆轉倍數=耐藥株IC50、加逆轉劑后IC50。 4、流式細胞儀檢測細胞調亡。 結果: MTT法測得表柔比星單獨作用于K562/DNR細胞株的IC50為417.0ug/ml,聯(lián)合硼替佐米后IC50為210.4ug/ml,逆轉倍數為1.98倍;柔紅霉素單獨作用于K562/DNR細胞株的IC50為457.7ug/ml,聯(lián)合硼替佐米

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