益生菌基因組DNA免疫佐劑的研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、高致病性禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)H5N1亞型自1997年香港爆發(fā)后重挫全球經(jīng)濟(jì),威脅公眾健康。AIVH5N1的高致病性和高變異性給疫苗的研制和應(yīng)用帶來極大的困難。為此,研制能夠提高宿主整體免疫力、抵御交叉感染和延長(zhǎng)保護(hù)時(shí)間的禽流感疫苗佐劑顯得相當(dāng)有意義。益生菌基因組DNA作為新型核酸佐劑具有提高疫苗效力的潛力,因此有著巨大的研發(fā)價(jià)值。
   本研究選用多種益生菌,提取其基因組DNA作為AI

2、VH5N1油乳苗的佐劑,并首次比較致病菌基因組DNA和人工合成的CpG寡聚核苷酸(CpGODN)的免疫佐劑性。分不同劑量、不同免疫途徑從體液免疫、細(xì)胞免疫、細(xì)胞因子分泌等多方面探討其作為免疫佐劑的效果,以期找到能夠較好提高AIVH5N1油乳苗效力的核酸佐劑及其遞呈方式。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:無(wú)論是益生菌基因組DNA(糞鏈球菌、嗜酸乳桿菌、枯草芽孢桿菌、雙歧桿菌、屎鏈球菌),致病菌基因組DNA(革蘭氏陰性菌大腸桿菌和革蘭氏陽(yáng)性金黃色葡萄球菌),還

3、是合成的CpGODN與AIV油乳苗同位點(diǎn)先后注射免疫時(shí),血凝抑制(HI)效價(jià)均被嚴(yán)重削弱,而淋巴細(xì)胞活性、巨噬細(xì)胞吞噬活性和血清IFN-γ和IL-10濃度卻略有提高。當(dāng)益生菌糞鏈球菌FQ68基因組DNA,致病菌大腸桿菌和金黃色葡萄球菌基因組DNA及CpGODN油裹于AIV油乳苗內(nèi)后再行注射免疫時(shí),CpGODN和FQ68基因組能提高HI效價(jià)、血清IgG效價(jià)和血清IFN-γ濃度,而降低血清IL-10濃度,其中CpGODN免疫佐劑性較FQ68

4、基因組明顯,而致病菌大腸桿菌和金黃色葡萄球菌基因組DNA對(duì)AIV油乳苗的免疫佐劑性較差。結(jié)論顯示,基于核酸佐劑和疫苗在動(dòng)物體內(nèi)遞呈方式的差異所導(dǎo)致免疫效果的不同:如果核酸佐劑在免疫時(shí)游離于疫苗抗原,其表現(xiàn)出的免疫佐劑性較差,而當(dāng)核酸佐劑油裹于油乳苗內(nèi)再行免疫,CpGODN和益生菌基因組DNA均能提高體液和Thl型免疫應(yīng)答水平,且CpGODN免疫佐劑性好于天然細(xì)菌基因組DNA。本研究同時(shí)還得出CpG基序在動(dòng)物模型雞上也能誘導(dǎo)Thl型免疫應(yīng)

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