Rock2通過pGSK-3β-β-catenin信號通路調(diào)控CEBPD表達(dá)影響肝癌細(xì)胞增殖的研究.pdf

1、分類號：密級：UDC：學(xué)號：T10411201101038南昌大學(xué)專業(yè)學(xué)位博士研究生南昌大學(xué)專業(yè)學(xué)位博士研究生學(xué)位論文學(xué)位論文Rock2通過通過pGSK3ββcatenin信號通路調(diào)控信號通路調(diào)控CEBPD表達(dá)影響肝癌細(xì)胞增殖的研究表達(dá)影響肝癌細(xì)胞增殖的研究Rock2controlCEBPDexpressioneffectofhepatocellularcarcinomaproliferationbyphosphoGSK3ββcaten

2、insignalingpathways周瑋周瑋培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：邵江華教授申請學(xué)位的學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱：外科學(xué)（普通外科）論文答辯日期：2015年6月答辯委員會主席：評閱人：2015年6月摘要II摘要摘要研究背景和目的：研究背景和目的：手術(shù)切除是目前治療肝細(xì)胞癌（HCC）主要方法，但僅有不足20%的患者能及時進(jìn)行根治性的手術(shù)切除，這主要是因為肝癌細(xì)胞的惡性程度高、發(fā)生轉(zhuǎn)移早、呈快速浸潤性

3、生長所導(dǎo)致的。因此，研究肝癌增殖的調(diào)控分子機(jī)制，尋找有效的防治靶點(diǎn)已成為肝癌治療領(lǐng)域研究的一個關(guān)鍵性問題。Rho相關(guān)卷曲螺旋形成蛋白激酶2（Rhoassociatedcoiledcoilfmingproteinkinase2，Rock2）是RhoRock信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的關(guān)鍵信號分子，其在肝癌的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。CCAAT增強(qiáng)結(jié)合子蛋白δ(CCAATenhancerbindingproteinCEBPδ，CEBPD)屬于CCAAT

4、增強(qiáng)結(jié)合子蛋白家族的一員，其可抑制腫瘤細(xì)胞增殖。我們前期通過基因芯片篩選在肝癌細(xì)胞中降低Rock2表達(dá)可導(dǎo)致CEBPD表達(dá)升高。肝癌是一種增殖能力強(qiáng)的腫瘤，所以我們推測Rock2在可能通過調(diào)控CEBPD的表達(dá)從而影響肝癌細(xì)胞增殖。本研究擬先檢測Rock2和CEBPD在肝癌組織中的表達(dá)，并分析其關(guān)聯(lián)；其次通過體外和體內(nèi)研究明確Rock2調(diào)控CEBPD表達(dá)對肝癌增殖生物學(xué)特性的影響；其次探討Rock2調(diào)控CEBPD的分子生物學(xué)機(jī)制。方法：方

5、法：1、通過運(yùn)用通過熒光定量PCR和Westernblot方法檢測51例肝癌組織、癌旁組織及多種肝癌細(xì)胞系中Rock2和CEBPDmRNA及蛋白的表達(dá)水平，并通過散點(diǎn)圖分析兩者的相關(guān)性；2、降低肝癌細(xì)胞中Rock2的表達(dá)，運(yùn)用熒光定量PCR和Westernblot檢測細(xì)胞中CEBPDmRNA和蛋白表達(dá)變化，同時利用CCK8和EDU實驗觀察肝癌細(xì)胞增殖能力的變化；3、利用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染shRock2的肝癌細(xì)胞株建立人肝癌裸鼠皮下瘤模型，觀察荷瘤