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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探討Rho相關(guān)卷曲螺旋形成蛋白激酶2(Rho associated coiled coil containing proteinkinase2,Rock2)調(diào)控 CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白 Delta(CCAAT/enhancer-binding protein delta,CEBPD)的表達(dá)對(duì)肝癌細(xì)胞增殖功能的影響。
方法:
1、用熒光定量PCR法檢測(cè)20例肝癌組織及對(duì)應(yīng)癌旁組織中Rock2和CEB
2、PD的mRNA表達(dá),同時(shí)分析它們之間的關(guān)聯(lián);
2、用Western blot法檢測(cè)20例肝癌組織及對(duì)應(yīng)癌旁組織中Rock2和CEBPD的蛋白表達(dá),同時(shí)分析它們之間的關(guān)聯(lián);
3、用熒光定量PCR法觀察降低Rock2細(xì)胞中CEBPD mRNA表達(dá)變化;
4、用Western blot法觀察降低Rock2細(xì)胞中CEBPD蛋白表達(dá)變化;
5、采用EDU實(shí)驗(yàn)和CCK8實(shí)驗(yàn)觀察無意干擾對(duì)照組、下調(diào)表達(dá)Rock
3、2組HCCLM3、SMMC7721肝癌細(xì)胞增殖能力的變化。
結(jié)果:
1、Rock2在肝癌組織表達(dá)明顯高于癌旁組織,CEBPD在肝癌組織表達(dá)明顯低于癌旁組織,且兩者的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性。
2、沉默肝癌細(xì)胞中Rock2的表達(dá)后發(fā)現(xiàn)CEBPD的mRNA和蛋白表達(dá)水平上調(diào);
3、Rock2通過調(diào)節(jié)CEBPD表達(dá)從而影響肝癌細(xì)胞的增殖功能。
結(jié)論:
在原發(fā)性肝癌細(xì)胞中沉默Rock2可引起CE
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