含飽和氫氣乳酸鈉林格氏液對大鼠肝臟冷缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的:研究含飽和氫氣乳酸鈉林格氏液對大鼠肝臟冷缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及相關(guān)機(jī)制。
　　方法:采用隨機(jī)數(shù)字表法，將24只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為3組:假手術(shù)組（S組）、乳酸鈉林格氏液灌注組（RL組）、含飽和氫氣乳酸鈉林格氏液灌注組（HRL組），每組8只。將氫氣加入乳酸鈉林格氏液中制成含飽和氫氣乳酸鈉林格氏液。S組僅接受開關(guān)腹操作。RL組和HRL組阻斷全肝血流后，門靜脈穿刺作為流入道，肝下下腔靜脈作為流出道，分別接受4℃乳酸鈉林格氏

2、液和4℃含飽和氫氣乳酸鈉林格氏液灌注(6～8 mL/min)，時(shí)間為20 min?；謴?fù)灌注6h后經(jīng)肝下下腔靜脈采集血樣，測定血清轉(zhuǎn)氨酶ALT、AST，細(xì)胞因子TNF-α和IL-6水平;切取肝組織，采用硫代巴比妥酸法測定MDA水平、黃嘌呤氧化酶法測定SOD水平，免疫組化法檢測肝組織活化的caspase-3表達(dá)水平，TUNEL法檢測肝臟組織細(xì)胞凋亡情況，HE染色后觀察肝組織形態(tài)學(xué)變化，半定量PCR法檢測肝組織NF-κB mRNA表達(dá)水平。采

3、用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示，組間比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:再灌注6h后，HRL組肝組織病理學(xué)損傷較RL組減輕。與S組比較，RL組和HRL組血清ALT、AST、TNF-α和IL-6水平升高，肝組織MDA水平、活化的caspase-3表達(dá)和凋亡細(xì)胞百分比升高，肝組織SOD水平降低，肝組織NF-κBmRNA表達(dá)水平升高(P＜0.05或0.01

4、);與RL組比較，HRL組血清ALT、AST、TNF-α、IL-6水平降低，肝組織MDA水平、活化的caspase-3表達(dá)和凋亡細(xì)胞百分比降低，肝組織SOD水平升高，肝組織NF-κB mRNA表達(dá)水平降低(P＜0.05或0.01)。
　　結(jié)論:1、本研究采用的大鼠肝臟冷缺血再灌注模型包含冷灌注、再復(fù)流過程，能模擬肝移植供肝灌注、再植過程。再灌后6h后，轉(zhuǎn)氨酶升高，肝組織病理學(xué)損傷，提示建模成功;2、應(yīng)用含飽和氫氣乳酸鈉林格氏液后，