5-羥基癸酸鹽對(duì)低氧肺動(dòng)脈高壓大鼠肺血管重建的影響及機(jī)制探討.pdf

1、目的:研究線(xiàn)粒體ATP敏感性鉀通道抑制劑(5-羥基癸酸鹽簡(jiǎn)稱(chēng)5-HD)對(duì)大鼠低氧性肺動(dòng)脈高壓(HPH)及其肺血管結(jié)構(gòu)重建的影響。
　　 方法:將SPF級(jí)雄性Splague-Dawley(SD)大鼠24只,體重(250～300)g,隨機(jī)分為正常組(N組),慢性缺氧+PBS組(CH組),慢性缺氧組(CH組)+5-HD組(5mg/kg),每組8只。慢性缺氧組置于常壓低氧艙內(nèi),艙內(nèi)充入氮?dú)庀♂尡３值脱?使氧濃度保持在10.0％±0.5％

2、,CO2和水蒸氣分別由鈉石灰和無(wú)水氯化鈣吸收,CO2濃度維持在2.0％～3.0％。每天8 h,每周6 d,連續(xù)四周。大鼠在慢性低氧一周后,每天皮下注射5-HD一次,時(shí)間為3周,對(duì)照組置于同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。四周后右心導(dǎo)管法測(cè)肺動(dòng)脈平均壓(mPAP),頸總動(dòng)脈插管測(cè)頸動(dòng)脈平均壓(mCAP),稱(chēng)取右室(RV)和左室+室間隔(LV+S)的重量,以RV/(Lv+S)重量比來(lái)反映右心室重量的變化。光鏡下結(jié)合圖象分析軟件測(cè)定相對(duì)肺動(dòng)脈中膜厚度度(PAMT

3、),透射電鏡觀察肺細(xì)小動(dòng)脈超微結(jié)構(gòu)的變化,免疫組化法測(cè)定肺小動(dòng)脈管壁a-actin表達(dá)量,反映肺血管重建情況。酶標(biāo)儀法檢測(cè)肺組織勻漿Caspase9、Caspase3酶活性反映肺血管凋亡情況。
　　 結(jié)果:
　　 1、CH組mPAP、RV/(LV+S)、PAMT顯著高于正常N組(P<0.05)；CH+5-HD干預(yù)組mPAP、RV/(LV+S)、PAMT顯著低于CH組,但高于N組P<0.05)；組間mCAP比較無(wú)顯著性差異

4、(P>0.05)。
　　 2、CH組肺小動(dòng)脈管壁a-actin含量顯著高于正常組(P<0.05)；CH+5-HD干預(yù)組大鼠肺細(xì)小動(dòng)脈a-actin含量顯著低于CH組(P<0.05)。
　　 3、透射電鏡顯示CH組肺小動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞腫脹,豎狀突起,凸向管腔,與基底膜相連處有大量空泡,內(nèi)彈力板高度扭曲,粗細(xì)不均勻,部分區(qū)域結(jié)構(gòu)不清甚至斷裂,膠原纖維增多,中膜平滑肌細(xì)胞增生、腫脹,膠原纖維增生。CH+5-HD組肺小動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞基

5、本恢復(fù)正常,中膜平滑肌層變薄,粗細(xì)均勻,膠原纖維明顯減少。
　　 4、光鏡下大鼠肺血管形態(tài)學(xué)影響的觀察:HE染色切片顯示正常組大鼠肺小動(dòng)脈管壁菲薄,厚薄一致,低氧組大鼠肺小動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增生肥大,管壁普遍增厚,管腔明顯狹窄,5-HD干預(yù)組大鼠肺小動(dòng)脈管壁增厚程度及血管腔狹窄程度顯著減輕。維多利亞藍(lán)彈力膜染色觀察各組大鼠腺泡肺動(dòng)脈3種類(lèi)型血管構(gòu)成比的改變:正常組呼吸性細(xì)支氣管水平環(huán)肌型動(dòng)脈明顯減少,以無(wú)肌型動(dòng)脈為主,而低氧組肺小動(dòng)

6、脈管壁較厚,內(nèi)外兩層彈力纖維膜之間距離增寬,IAPA中的CMA、PAM構(gòu)成比升高,NMA顯著減低,而5-HD干預(yù)組構(gòu)成比較低氧組明顯降低(P<0.05)。
　　 5、CH組大鼠肺組織勻漿Caspase9酶活性顯著低于N組(P<0.05)；CH+5-HD)組大鼠肺組織勻漿Caspase9酶活性顯著高于CH組(P<0.05)。CH組大鼠肺組織勻漿Caspase3酶活性顯著低于N組(P<0.05)；CH+5-HD組大鼠肺組織勻漿Cas