虎杖苷對(duì)大鼠低壓低氧性肺動(dòng)脈高壓的預(yù)防作用及其機(jī)制研究.pdf

1、1、研究背景：
　　高原肺水腫（high altitude pulmonary edema，HAPE）是人體在進(jìn)入高原環(huán)境后缺乏適應(yīng)的情況下，發(fā)生的一種以肺動(dòng)脈血管相關(guān)病變?yōu)橹饕卣鞯募膊　Ｆ渲饕蚩赡芘c缺氧和炎癥介質(zhì)導(dǎo)致肺毛細(xì)血管床血管壁通透性增加、肺毛細(xì)血管結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞、以及肺動(dòng)脈高壓共同作用有關(guān)。低氧性肺動(dòng)脈高壓（hypoxic pulmonary hypertension，HPH）已被認(rèn)為是高原肺水腫病程發(fā)展中的關(guān)鍵因素

2、，若能降低肺動(dòng)脈高壓或延緩肺動(dòng)脈高壓的進(jìn)程，將會(huì)有效的防止此類(lèi)疾病的發(fā)生。大量研究證實(shí)：肺血管收縮反應(yīng)性增強(qiáng)和肺血管結(jié)構(gòu)重建(pulmonary vascular remodeling，PVR)是肺動(dòng)脈高壓形成的血管變化特征，其中肺血管重建（PVR）不但是肺動(dòng)脈高壓持續(xù)發(fā)展的關(guān)鍵因素，而且是血管對(duì)擴(kuò)張降壓藥物產(chǎn)生抵抗的主要原因之一，因此，如何阻止及逆轉(zhuǎn)肺血管重建亦是有效防治肺動(dòng)脈高壓近而防治高原肺水腫的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
　　虎杖苷（po

3、lydatin，PD）是中藥虎杖中提取的一種單體化合物，具有抑制心肌細(xì)胞收縮和血小板聚集、抗氧化和休克、減輕多種因素造成的組織器官損傷等藥理作用，此外，還能延緩常壓低氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生，但未見(jiàn)PD對(duì)接近高原環(huán)境的低壓低氧性模型動(dòng)物影響的研究報(bào)道。
　　本實(shí)驗(yàn)?zāi)M海拔5000米高度的低壓低氧環(huán)境，復(fù)制低壓低氧性肺動(dòng)脈高壓大鼠模型，觀察不同劑量的PD對(duì)動(dòng)物模型功能、形態(tài)學(xué)的干預(yù)作用，并初步探討其作用機(jī)制，為臨床治療HAPE提供新的理

4、論依據(jù)。
　　2、研究目的：
　　2.1、觀察不同劑量PD對(duì)低壓低氧性肺動(dòng)脈高壓模型大鼠肺動(dòng)脈高壓和右心室肥厚的預(yù)防作用；
　　2.2、觀察不同劑量PD對(duì)低壓低氧性肺動(dòng)脈高壓模型大鼠肺血管重建的影響，并探討其影響機(jī)制；
　　2.3、研究不同劑量PD對(duì)低壓低氧性肺動(dòng)脈高壓模型大鼠血清和肺組織中一氧化氮（NO）含量、一氧化氮合酶（NOS）活性與肺動(dòng)脈高壓發(fā)病機(jī)制有關(guān)的血管活性物質(zhì)的調(diào)控作用。
　　3、研究方法：

5、
　　3.1、將雄性SD大鼠隨機(jī)分為6組，即對(duì)照組，低壓低氧組，預(yù)防組（ip.5mg·kg-1、10mg·kg-1和20mg·kg-1PD）和陽(yáng)性對(duì)照組（ig.1.7mg·kg-1西地那非）。采用全自動(dòng)低壓低氧艙模擬海拔5000米高度氣壓環(huán)境（大氣壓約為50kPa），建立低壓低氧性肺動(dòng)脈高壓大鼠模型；
　　3.2、右心漂浮導(dǎo)管法測(cè)量大鼠肺動(dòng)脈平均壓（mPAP），左頸總動(dòng)脈插管測(cè)定頸動(dòng)脈平均壓(mCAP)；
　　3.3、

6、稱量大鼠右心室（RV）和左心室（LV）加室間隔（S）重量，以右心肥厚指數(shù)RV/（LV+S）比值反映右心室肥厚程度；
　　3.4、光鏡下觀察肺小動(dòng)脈形態(tài)學(xué)變化，結(jié)合圖像分析軟件測(cè)量與呼吸性支氣管和肺泡伴行的肺細(xì)小動(dòng)脈中膜平滑肌細(xì)胞核密度（SMC）、中膜厚度（PAMT）以及肺細(xì)小動(dòng)脈管壁厚度占血管外徑的百分比（WT％）和管壁面積與血管總面積的百分比（WA％），以反映低氧性肺血管重塑情況；
　　3.5、測(cè)定低壓低氧和不同劑量PD干

7、預(yù)后大鼠血清、肺組織中NO含量、NOS活性。
　　4、研究結(jié)果：
　　4.1、PD對(duì)大鼠mPAP、RV/（LV+S）、PAMT、SMC、WT％和WA％的影響
　　對(duì)照組依次為18.35±2.39mmHg、21.93±1.66％、13.49±2.77μm、5.91±1.23、31.04±3.43％和42.83±4.36％；低壓低氧組為32.05±3.19mmHg、36.94±2.67％、27.91±4.43μm、9.32

8、±1.67、49.41±4.59％和71.72±4.64％，顯著高于對(duì)照組（P＜0.01）；PD中、高劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組各指標(biāo)明顯低于低壓低氧組（P＜0.05或P＜0.01）。
　　4.2、PD對(duì)大鼠血清和肺組織中NO含量、NOS和cNOS活性的影響
　　對(duì)照組依次為66.34±5.41μmol·L-1、23.18±1.44U·mL-1和14.51±1.46U·mL-1；低壓低氧組為41.07±3.71μmol·L-1、12

9、.59±1.50U·mL-1和7.19±1.85U·mL-1，顯著低于對(duì)照組（P＜0.01）；肺組織勻漿中NO含量、NOS和cNOS活性：對(duì)照組依次為0.397±0.060μmol·(gprot)-1、0.752±0.044U·(mgprot)-1和0.511±0.064U·(mgprot)-1；低壓低氧組為0.316±0.046μmol·(gprot)-1、0.605±0.069U·(mgprot)-1和0.387±0.030U·(m

10、gprot)-1，顯著低于對(duì)照組（P＜0.01）；而PD中、高劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組血清和肺組織勻漿中各指標(biāo)均高于低壓低氧組（P＜0.05或P＜0.01）。
　　5、結(jié)論：
　　5.1、PD給藥21d可有效降低低壓低氧大鼠的肺動(dòng)脈平均壓（mPAP），減輕其右心室肥厚，提示PD對(duì)大鼠的肺動(dòng)脈高壓有明顯的預(yù)防作用；
　　5.2、PD給藥21d可明顯改善低壓低氧性肺動(dòng)脈高壓大鼠的肺小動(dòng)脈結(jié)構(gòu)重建；
　　5.3、PD給藥21