斯伐他汀對低氧性肺動脈高壓的預(yù)防作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察羥甲基戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶抑制劑-斯伐他汀(Simvastatin)對低氧培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞合成和分泌內(nèi)皮素-1(ET-1)的影響；探討斯伐他汀對低氧性肺動脈高壓的預(yù)防作用及其機(jī)制。 方法：低氧培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，采用斯伐他汀以不同濃度和不同時間進(jìn)行干預(yù)，并用甲羥戊酸調(diào)節(jié)斯伐他汀的作用，采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測內(nèi)皮細(xì)胞ET-1mRNA的表達(dá)；采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測內(nèi)

2、皮細(xì)胞上清液中ET-1的濃度。將30只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組、低氧組和斯伐他汀預(yù)防組，常壓低氧建立大鼠肺動脈高壓模型，預(yù)防組于低氧前給予斯伐他汀10mg／kg灌胃。以導(dǎo)管法測定平均肺動脈壓(mPAP)，檢測大鼠的紅細(xì)胞壓積(HCT)和血清膽固醇濃度；分別稱量大鼠心臟右心室(RV)和左心室加室間隔(LV+S)的重量，計算出右心室肥厚指數(shù)RV／(LV+S)；采用圖象分析技術(shù)測定大鼠肺小動脈管壁厚度(WT)和面積(WA)的變化，計算出

3、肺小動脈管壁厚度指標(biāo)—管壁厚度占外徑的百分比(WT％)和管壁面積占總面積的百分比(WA％)；采用RT-PCR檢測大鼠肺組織ET-1mRNA和血管緊張素Ⅱ(Ang-Ⅱ)受體-1(ATl)mRNA，免疫組織化學(xué)染色方法檢測大鼠肺小動脈管壁ET-l和ATl的表達(dá)水平。 結(jié)果：(1)與對照組相比，1μmol／L濃度的斯伐他汀對內(nèi)皮細(xì)胞ET-1mRNA和ET-1表達(dá)沒有影響，2.5gmol／L斯伐他汀即可抑制ET-1的表達(dá)，5gmol／L

4、及l(fā)OlamolIL,濃度時則更加明顯(P<0.01)；(2)與對照組相比，以lOgmol／L斯伐他汀干預(yù)低氧培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞，低氧12h后，內(nèi)皮細(xì)胞ET-1 mRNA和ET-1表達(dá)明顯減少，24h后繼續(xù)減低，48h達(dá)到最小；(3)lOOgmol／L甲羥戊酸可以阻止斯伐他汀對低氧培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞合成和分泌ET-1的抑制作用；(4)低氧組大鼠mPAP為(29.3±2.27)mmHg，而預(yù)防組下降到(22.6±3.86)mmHg(P<0.01)

5、；預(yù)防組RV／(LV+S)為(25.13±0.75)％，較低氧組[(33.18±1.58)％]明顯降低(P<0.01)；(5)低氧組肺小動脈厚度指標(biāo)為[wT％：(25.85±1.69)％：WA％：(76.06±5.43)％]，而預(yù)防組則下降為[WT％：(15.98±1.96)％：WA％：(54.38±3.51)％](P均<0.01)；(6)預(yù)防組HCT為(43.51±2.08)％，較低氧組(51.37±5.55)％明顯下降(P<0.01

6、)；(7)低氧組肺組織ET-1 ERNA和ATl mRNA光密度值分別為(0.98±0.07)和.(0.56±0.05)，預(yù)防組下降到(0.69±0.02)和(0.37±O.04)(P均<0.01)；(8)低氧組肺小動脈ET-1和ATl受體的染色強(qiáng)度分別為(ET-1：1.68±0.03；ATl：1.57±0.13)，而預(yù)防組則分別為(ET-1：1.29±0.06；ATl：1.23±0.09)，較前者明顯下降(P均<0.01)；(9)三組