大高良姜中1′-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯的分離、純化、結(jié)構(gòu)鑒定和抗菌活性的研究.pdf

1、大高良姜是姜科良姜屬植物大高良姜Alpiniagalanga(L.)Swartz的干燥根莖，其廣泛分布于東南亞各國(guó)，在我國(guó)的廣東、廣西、云南、臺(tái)灣等省區(qū)都有分布。在東南亞各國(guó)及我國(guó)的粵東地區(qū)，大高良姜作為調(diào)味料廣泛用于民間風(fēng)味食品及烹調(diào)中，也是重要的中藥。ACA是大高良姜揮發(fā)性油中最主要的有效成分，具有抗癌、抗腫瘤、抗艾滋病毒、抗黃嘌呤氧化酶、抗氧化、抗?jié)?、抗菌、抗結(jié)核病毒、殺蟲等生物活性，體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)證明：ACA是一種廣譜的抗癌劑并

2、且沒(méi)有明顯的副作用，因此引起了生物學(xué)家、病理學(xué)家、醫(yī)學(xué)家、藥物學(xué)家、營(yíng)養(yǎng)學(xué)家和自由基化學(xué)家的廣泛關(guān)注。本文以廣西陽(yáng)朔的大高良姜為實(shí)驗(yàn)材料，綜合應(yīng)用食品科學(xué)、有機(jī)化學(xué)、天然產(chǎn)物化學(xué)、分析化學(xué)、生物技術(shù)及現(xiàn)代儀器分析等一系列現(xiàn)代研究方法和技術(shù)手段，較為系統(tǒng)地研究了從大高良姜中提取純化ACA，對(duì)ACA的含量測(cè)定、提取純化、結(jié)構(gòu)鑒定及抗菌活性進(jìn)行了較深入的研究，為ACA用于新藥開(kāi)發(fā)的研究和作為功能性食品基料奠定了基礎(chǔ)。主要研究?jī)?nèi)容與結(jié)論概括如下

3、： 1.探索并比較了乙醇回流法和超臨界二氧化碳萃取法(SFE-CO2法)對(duì)大高良姜中的ACA的提取工藝。在單因素基礎(chǔ)上采用正交L9(34)實(shí)驗(yàn)對(duì)乙醇回流提取大高良姜中的ACA的工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化得出最佳工藝條件。最佳條件下得到：萃取物的得率為4.68％，其中ACA的純度為27.15％，ACA含量為12.71mg/g。在單因素基礎(chǔ)上采用正交Lg(34)實(shí)驗(yàn)對(duì)SFE-CO2法提取大高良姜中的ACA的工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化得出最佳提取條件

4、。最優(yōu)條件下得到：揮發(fā)油的得率為4.78％，其中ACA的純度為78.11％，ACA含量為37.34mg/g。兩種方法比較得出：SFE-CO2法提取的得率和ACA純度均大于乙醇回流提取法，且操作方便，提取時(shí)間短，無(wú)溶劑殘留，大大提高了萃取效率。SFE-CO2法提取大高良姜中的ACA明顯優(yōu)于乙醇回流法。 2.對(duì)超臨界二氧化碳萃取的大高良姜揮發(fā)油進(jìn)行GC-MS和LC-MS分析，得出大高良姜揮發(fā)油主要含有ACA，且是同分異構(gòu)體形式存在。

5、并建立了從大高良姜揮發(fā)油中檢測(cè)ACA的方法，分別應(yīng)用了薄層色譜(TLC)和高效液相色譜(HPLC)技術(shù)對(duì)大高良姜的ACA進(jìn)行定性定量的研究。TLC實(shí)驗(yàn)結(jié)果是：展開(kāi)劑為正己烷：乙酸乙酯=85:15，ACA的Rf值為0.39。HPLC實(shí)驗(yàn)結(jié)果是：流動(dòng)相為甲醇：水=50:50，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，發(fā)現(xiàn)此方法精密度高，重現(xiàn)性，穩(wěn)定性和回收率效果較好，適合大高良姜揮發(fā)油中ACA的定量檢測(cè)。 3.對(duì)超臨界二氧化碳萃取的大高良姜揮發(fā)油中的A

6、CA進(jìn)行分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定的研究，采用硅膠柱純化并進(jìn)行重結(jié)晶得到無(wú)色結(jié)晶物，最終得到純度為99.6％無(wú)色結(jié)晶物，經(jīng)過(guò)UV，IR，MS，1H和13CNMR光譜分析進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，確定為ACA。熔點(diǎn)測(cè)定得知ACA的熔點(diǎn)為67.3℃，熱重分析可知其具有熱不穩(wěn)定性，ACA經(jīng)過(guò)x-衍射可以看到其是以晶體的形式存在，沒(méi)有非晶區(qū)。本研究的方法得到ACA簡(jiǎn)單，快速，產(chǎn)量高，產(chǎn)品質(zhì)量好。 4.對(duì)超臨界CO2萃取前、后的大高良姜粉末主要成分的測(cè)定，結(jié)