rhG-CSF對糖尿病并發(fā)腦梗死大鼠神經(jīng)細(xì)胞增殖的實驗研究.pdf

1、前言: 隨著人口增加及老齡化程度的加重，糖尿病患者有明顯上升趨勢，對糖尿病患者生活質(zhì)量威脅最大的是血管并發(fā)癥，并且主要以腦梗死為主。其病變范圍廣泛，復(fù)發(fā)率病死率高。有關(guān)糖尿病合并腦血管病的治療方面的研究日益受到神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的重視。G-CSF是骨髓造血干細(xì)胞的強(qiáng)有力的動員劑，已經(jīng)證實G-CSF具有同時動員造血干細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞的能力。應(yīng)用G-CSF動員自體骨髓干細(xì)胞可促進(jìn)骨髓干細(xì)胞向腦內(nèi)遷移、增殖、分化[4]。在腦梗死的特定病理

2、環(huán)境中向神經(jīng)細(xì)胞分化，以修復(fù)梗死的腦組織或保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞免受損傷。本研究在糖尿病模型基礎(chǔ)上，進(jìn)行局灶腦缺血再灌注模型(MCAO)制備，對大鼠進(jìn)行rhG-CSF干預(yù)，采用免疫組化方法研究糖尿病腦缺血再灌注后大鼠腦組織內(nèi)BrdU的表達(dá)情況。為臨床治療糖尿病合并缺血性腦血管病提供理論依據(jù)。 實驗方法: 取健康Wistar大鼠，腹腔注射四氧嘧啶制備糖尿病模型，6周后采用改良線栓法建立大鼠大腦中動脈閉塞(MCAO)模型。大鼠隨機(jī)分成

3、對照組、rhG-CSF組，每組又分7d、14d和21d個時間點，每一時間點均為12只大鼠。G-CSF干預(yù)組術(shù)后每日頸部皮下注射rhG-CSF50μg/kg，對照組注射等量的生理鹽水。各組同時腹腔注射BrdU10mg/kg。采用Chen等制定的神經(jīng)功能評分標(biāo)準(zhǔn)。免疫組化法檢測BrdU蛋白的表達(dá)；各組于術(shù)后7d、14d、21d分別取12只大鼠，分別在高倍鏡(400×)下隨機(jī)觀察缺血側(cè)額頂葉及紋狀體區(qū)不重疊的5個高倍視野，顯微圖像分析系統(tǒng)采集

4、圖像，計數(shù)陽性細(xì)胞數(shù)，取其平均數(shù)。各組數(shù)據(jù)均以x±s表示，采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行方差分析及t檢驗，各組數(shù)據(jù)行單因素方差分析ANOVA，P<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。 實驗結(jié)果: 1、神經(jīng)功能評分結(jié)果腦缺血1d時各組神經(jīng)功能評分無顯著差異；7d、14d、21d后rhG-CSF干預(yù)組神經(jīng)功能評分明顯低于對照組(P<0.01)。 2、BrdU免疫組織化學(xué)染色結(jié)果rhG-CSF干預(yù)組和對照組大鼠在腦缺血周邊區(qū)均有