糖尿病早期視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞與神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞改變的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、糖尿病視網(wǎng)膜病變(Diabetic Retinopathy,DR)是糖尿病的嚴(yán)重并發(fā)癥,是成年人致盲的主要原因之一.由于發(fā)病機(jī)制不明確,其治療也受到一定限制.一直以來(lái),大部分的研究關(guān)注于視網(wǎng)膜血管的變化,而對(duì)糖尿病早期的神經(jīng)細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞改變知之甚少.目的:該課題旨在研究早期糖尿病動(dòng)物模型視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的變化,探討神經(jīng)細(xì)胞及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞在糖尿病視網(wǎng)膜病變中所擔(dān)當(dāng)?shù)慕巧?以及它們與視網(wǎng)膜微血管病變之間可能存在的聯(lián)系

2、.實(shí)驗(yàn)一:糖尿病大鼠早期視網(wǎng)膜電流圖的變化 材料和方法:采用1﹪鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)按照57mg·kg<'-1>的劑量,在Sprague-Dawley(SD)大鼠腹腔內(nèi)注射,建立糖尿病動(dòng)物模型作為實(shí)驗(yàn)組,并同時(shí)建立對(duì)照組;分別于實(shí)驗(yàn)前、實(shí)驗(yàn)第1、2、4、8周末對(duì)兩組進(jìn)行視網(wǎng)膜電流圖(Electroretinogram,ERG)檢查,記錄暗適應(yīng)眼最大電反應(yīng)的a波與b波振幅及振蕩電位(Oscillatory P

3、otentials,OPs)振幅總和.兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)作統(tǒng)計(jì)分析.實(shí)驗(yàn)二 糖尿病大鼠視網(wǎng)膜GFAP、Vimentin及S-100的表達(dá) 材料和方法:選用第1、2、4、6、8及12周末STZ誘導(dǎo)糖尿病實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組SD大鼠眼球,石蠟包埋后連續(xù)組織切片,EnVision<'+TM>二步法行膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(GlialFibrillary Acidic Protein,GFAP)、波形蛋白(Vimentin)和S-100免疫組織化學(xué)染色,光

4、鏡下觀察它們?cè)谝暰W(wǎng)膜各層的表達(dá),并通過(guò)測(cè)定陽(yáng)性顆粒面積(Area)和平均光密度值(Optical Density,OD)進(jìn)行定量分析.結(jié)果以兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì).實(shí)驗(yàn)三 糖尿病大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)谷氨酸和γ-氨基丁酸水平的變化 材料和方法:運(yùn)用柱前衍生高效液相色譜方法,測(cè)定第1、2、4、8周末STZ誘導(dǎo)糖尿病實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組SD大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)谷氨酸(Glutamate,Glu)和γ-氨基丁酸(Gamma Aminobutyric Acid,GA