利福平致大鼠膽汁淤積適應(yīng)過(guò)程的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景:藥物性肝損傷是臨床關(guān)注的焦點(diǎn)問(wèn)題,它不僅關(guān)系用藥后病人生命安全問(wèn)題,也是臨床醫(yī)生執(zhí)業(yè)過(guò)程中可能遇到的職業(yè)風(fēng)險(xiǎn)問(wèn)題。目前藥物性肝損傷已日益引起廣大醫(yī)生的重視,但是對(duì)藥物性肝損傷的適應(yīng)現(xiàn)象尚難以理解和識(shí)別,是特別值得關(guān)注的研究領(lǐng)域。由于醫(yī)學(xué)倫理要求,需要尋找合適的動(dòng)物模型開(kāi)展研究。
　　目的:建立利福平誘導(dǎo)的大鼠膽汁淤積及適應(yīng)性現(xiàn)象的動(dòng)物模型,為進(jìn)一步探討利福平肝毒性的適應(yīng)機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
　　方法:Wistar雄性大鼠32

2、只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組和利福平模型組。分別給予0.9％氯化鈉注射液10ml/(kg?d)和利福平混懸液100mg/(kg?d),每日一次定時(shí)空腹灌胃。使用眶底靜脈叢采血法連續(xù)、動(dòng)態(tài)收集大鼠血標(biāo)本:對(duì)兩組大鼠分別于0天、第7天、第14天、第21天、第28天、第35天及第49天末次給藥后12h,留取靜脈血,動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)大鼠血谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性以及總膽紅素(TB),直接膽紅素(DB)和堿性磷酸酶(ALP)水平變化。于第

3、14天和第49天分批處死大鼠,分期采集大鼠肝臟標(biāo)本。部分肝臟標(biāo)本制成10%肝勻漿,以用于檢測(cè)肝勻漿SOD、MDA、GSH-PX活力變化及肝勻漿總膽汁酸(TBA)水平,并進(jìn)行組織病理切片、HE染色及制備超薄切片用于觀察大鼠肝組織病理學(xué)及超微結(jié)構(gòu)改變。
　　結(jié)果:1.利福平和對(duì)照組大鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)束前均未出現(xiàn)死亡。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,利福平模型組大鼠皮毛無(wú)光澤,腳掌及尾部可見(jiàn)明顯橘黃染,大、小便色澤呈橘紅色(圖1),第49天時(shí)肉眼觀大鼠黃染程

4、度較前有所減輕。第49天時(shí)利福平模型組大鼠的肝/體重比高于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　2.與正常對(duì)照組相比,利福平組大鼠血清ALT,AST,ALP,TBIL,DBIL水平升高差異有顯著性(P<0.05),持續(xù)給藥后約在第7天至第14天達(dá)到高峰,之后呈現(xiàn)緩慢下降趨勢(shì)。
　　3.模型組大鼠肝臟黃染,邊緣稍鈍,質(zhì)地基本柔軟。肝組織HE染色可見(jiàn)利福平模型組肝細(xì)胞脂肪變性、輕度壞死和炎癥。電鏡下可見(jiàn)線粒體腫脹、

5、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)斷裂、毛細(xì)膽管擴(kuò)張及膽汁淤積。
　　4.與正常對(duì)照組相比,肝組織膽汁酸水平明顯升高(P<0.01),第49天水平較第14天相比有所降低(P<0.05)。肝勻漿MDA含量高于正常組(P<0.05),SOD與GPX活性低于正常組(P<0.05)。但在利福平持續(xù)給藥過(guò)程中,上述氧化性損傷指標(biāo)未見(jiàn)上升。
　　結(jié)論:1.成功地建立了利福平致大鼠膽汁淤積肝損傷的動(dòng)物模型,其肝損特點(diǎn)傷表現(xiàn)為以膽紅素升高為主,伴有輕-中度轉(zhuǎn)氨酶升高,