IGF-1R抑制劑鬼臼苦素抗上皮性卵巢癌的作用及機制.pdf

1、目的：探討胰島素樣生長因子-1受體抑制劑鬼臼苦素靶向治療上皮性卵巢癌的作用及機制. 方法：(1)體外培養(yǎng)上皮性卵巢癌細胞系SKOV-3及其耐藥系SKOV-3/DDP,采用體外藥物敏感性試驗觀察鬼臼苦素、順鉑對這兩種細胞系生長抑制作用,觀察鬼臼苦素聯(lián)合順鉑對這兩種細胞系協(xié)同生長抑制作用;(2)采用體外藥物敏感性試驗觀察鬼臼苦素聯(lián)合胰島素樣生長因子-1對SKOV-3細胞系細胞生長的影響,分設(shè)5組:①無血清組,②鬼臼苦素組,③胰島素樣

2、生長因子-1組,④鬼臼苦素+胰島素樣生長因子-1組,⑤正常對照組.(3)采用流式細胞術(shù)檢測鬼臼苦素、順鉑引起這兩種細胞系細胞周期的變化,使用Armexin V-FITC凋亡試劑盒檢測鬼臼苦素、順鉑對這兩種細胞系細胞凋亡和壞死率的影響:(4)采用Western印跡法觀察鬼臼苦素、順鉑對這兩種細胞系磷酸化胰島素樣生長因子-1受體表達的影響. 結(jié)果：(1)鬼臼苦素對SKOV-3及SKOV-3/DDP細胞系具有顯著的生長抑制作用,這種抑

3、制作用具有濃度依賴性,濃度較低時(約0.01uM-0.5uM)時即對這兩種細胞系具有顯著的生長抑制作用,但是劑量再增加時這種生長抑制作用不再明顯增加,即這兩種細胞系對低濃度鬼臼苦素更為敏感.鬼臼苦素對這兩種細胞系的IC50分別為0.71uM和0.82uM.順鉑對SKOV-3細胞系具有顯著的生長抑制作用,這種抑制作用具有濃度依賴性,其IC50為9.86uM,而順鉑對SKOV-3/DDP細胞系的生長沒有抑制作用.(2)鬼臼苦素聯(lián)合順鉑對這兩

4、種細胞系具有協(xié)同生長抑制作用,這種協(xié)同作用尤其是在使用小劑量鬼臼苦素和順鉑時較敏感.(3)鬼臼苦素聯(lián)合胰島素樣生長因子-1對SKOV-3細胞系細胞生長的影響:無血清組、鬼臼苦素組和胰島素樣生長因子-1+鬼臼苦素組的細胞生長均受到抑制,而胰島素樣生長因子-1組細胞生長增強.(4)鬼臼苦素使細胞系SKOV-3及SKOV-3/DDP細胞周期阻滯于G<,2>/M期,對照組及順鉑組無此現(xiàn)象,并且鬼臼苦素使這兩種細胞凋亡和壞死率均顯著提高,順鉑僅使

5、SKOV-3細胞凋亡和壞死率提高,而對SKOV-3/DDP細胞沒有影響.(5)胰島素樣生長因子-1能促進SKOV-3及SKOV-3/DDP細胞系磷酸化胰島素樣生長因子-1受體表達,當(dāng)胰島素樣生長因子-1與鬼臼苦素聯(lián)用時,隨著鬼臼苦素濃度的增加,磷酸化胰島素樣生長因子-1受體表達逐漸降低.(6)隨著濃度增加,鬼臼苦素使SKOV-3及SKOV-3/DDP細胞系磷酸化胰島素樣生長因子-1受體表達水平逐漸降低,并與鬼臼苦素對這兩種細胞的生長抑制

6、率顯著相關(guān).順鉑對SKOV-3細胞系磷酸化胰島素樣生長因子-1受體表達沒有影響. 結(jié)論：(1)鬼臼苦素不但對SKOV-3細胞系,而且對其順鉑耐藥系SKOV-3/DDP同樣具有生長抑制作用,并且這種生長抑制作用與這兩種細胞系磷酸化胰島素樣生長因子-1受體表達水平顯著相關(guān),提示鬼臼苦素能通過抑制胰島素樣生長因子-1受體磷酸化來抑制腫瘤細胞的生長.(2).鬼臼苦素對SKOV-3及SKOV-3/DDP胞系細胞的生長抑制作用主要是引起細胞

7、周期阻滯,導(dǎo)致細胞凋亡和壞死.(3)鬼臼苦素聯(lián)用順鉑對SKOV-3及SKOV-3/DDP細胞系具有協(xié)同生長抑制作用,這種協(xié)同作用尤其是在使用小劑量鬼臼苦素和順鉑時較敏感,表明鬼臼苦素能增加SKOV-3及SKOV-3/DDP細胞系對順鉑的敏感性,聯(lián)合用藥時,達到相同療效的情況下,可以減少化療藥物的用量.(4)鬼臼苦素能夠拮抗胰島素樣生長因子-1促腫瘤細胞生長作用,同時還能拮抗胰島素樣生長因子-1促腫瘤細胞胰島素樣生長因子-1受體磷酸化作用