IGF-1R抑制劑鬼臼苦素抗上皮性卵巢癌的作用及機(jī)制.pdf

1、目的：探討胰島素樣生長(zhǎng)因子-1受體抑制劑鬼臼苦素靶向治療上皮性卵巢癌的作用及機(jī)制. 方法：(1)體外培養(yǎng)上皮性卵巢癌細(xì)胞系SKOV-3及其耐藥系SKOV-3/DDP,采用體外藥物敏感性試驗(yàn)觀察鬼臼苦素、順鉑對(duì)這兩種細(xì)胞系生長(zhǎng)抑制作用,觀察鬼臼苦素聯(lián)合順鉑對(duì)這兩種細(xì)胞系協(xié)同生長(zhǎng)抑制作用;(2)采用體外藥物敏感性試驗(yàn)觀察鬼臼苦素聯(lián)合胰島素樣生長(zhǎng)因子-1對(duì)SKOV-3細(xì)胞系細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,分設(shè)5組:①無(wú)血清組,②鬼臼苦素組,③胰島素樣

2、生長(zhǎng)因子-1組,④鬼臼苦素+胰島素樣生長(zhǎng)因子-1組,⑤正常對(duì)照組.(3)采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)鬼臼苦素、順鉑引起這兩種細(xì)胞系細(xì)胞周期的變化,使用Armexin V-FITC凋亡試劑盒檢測(cè)鬼臼苦素、順鉑對(duì)這兩種細(xì)胞系細(xì)胞凋亡和壞死率的影響:(4)采用Western印跡法觀察鬼臼苦素、順鉑對(duì)這兩種細(xì)胞系磷酸化胰島素樣生長(zhǎng)因子-1受體表達(dá)的影響. 結(jié)果：(1)鬼臼苦素對(duì)SKOV-3及SKOV-3/DDP細(xì)胞系具有顯著的生長(zhǎng)抑制作用,這種抑

3、制作用具有濃度依賴性,濃度較低時(shí)(約0.01uM-0.5uM)時(shí)即對(duì)這兩種細(xì)胞系具有顯著的生長(zhǎng)抑制作用,但是劑量再增加時(shí)這種生長(zhǎng)抑制作用不再明顯增加,即這兩種細(xì)胞系對(duì)低濃度鬼臼苦素更為敏感.鬼臼苦素對(duì)這兩種細(xì)胞系的IC50分別為0.71uM和0.82uM.順鉑對(duì)SKOV-3細(xì)胞系具有顯著的生長(zhǎng)抑制作用,這種抑制作用具有濃度依賴性,其IC50為9.86uM,而順鉑對(duì)SKOV-3/DDP細(xì)胞系的生長(zhǎng)沒有抑制作用.(2)鬼臼苦素聯(lián)合順鉑對(duì)這兩

4、種細(xì)胞系具有協(xié)同生長(zhǎng)抑制作用,這種協(xié)同作用尤其是在使用小劑量鬼臼苦素和順鉑時(shí)較敏感.(3)鬼臼苦素聯(lián)合胰島素樣生長(zhǎng)因子-1對(duì)SKOV-3細(xì)胞系細(xì)胞生長(zhǎng)的影響:無(wú)血清組、鬼臼苦素組和胰島素樣生長(zhǎng)因子-1+鬼臼苦素組的細(xì)胞生長(zhǎng)均受到抑制,而胰島素樣生長(zhǎng)因子-1組細(xì)胞生長(zhǎng)增強(qiáng).(4)鬼臼苦素使細(xì)胞系SKOV-3及SKOV-3/DDP細(xì)胞周期阻滯于G<,2>/M期,對(duì)照組及順鉑組無(wú)此現(xiàn)象,并且鬼臼苦素使這兩種細(xì)胞凋亡和壞死率均顯著提高,順鉑僅使

5、SKOV-3細(xì)胞凋亡和壞死率提高,而對(duì)SKOV-3/DDP細(xì)胞沒有影響.(5)胰島素樣生長(zhǎng)因子-1能促進(jìn)SKOV-3及SKOV-3/DDP細(xì)胞系磷酸化胰島素樣生長(zhǎng)因子-1受體表達(dá),當(dāng)胰島素樣生長(zhǎng)因子-1與鬼臼苦素聯(lián)用時(shí),隨著鬼臼苦素濃度的增加,磷酸化胰島素樣生長(zhǎng)因子-1受體表達(dá)逐漸降低.(6)隨著濃度增加,鬼臼苦素使SKOV-3及SKOV-3/DDP細(xì)胞系磷酸化胰島素樣生長(zhǎng)因子-1受體表達(dá)水平逐漸降低,并與鬼臼苦素對(duì)這兩種細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制

6、率顯著相關(guān).順鉑對(duì)SKOV-3細(xì)胞系磷酸化胰島素樣生長(zhǎng)因子-1受體表達(dá)沒有影響. 結(jié)論：(1)鬼臼苦素不但對(duì)SKOV-3細(xì)胞系,而且對(duì)其順鉑耐藥系SKOV-3/DDP同樣具有生長(zhǎng)抑制作用,并且這種生長(zhǎng)抑制作用與這兩種細(xì)胞系磷酸化胰島素樣生長(zhǎng)因子-1受體表達(dá)水平顯著相關(guān),提示鬼臼苦素能通過(guò)抑制胰島素樣生長(zhǎng)因子-1受體磷酸化來(lái)抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng).(2).鬼臼苦素對(duì)SKOV-3及SKOV-3/DDP胞系細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用主要是引起細(xì)胞

7、周期阻滯,導(dǎo)致細(xì)胞凋亡和壞死.(3)鬼臼苦素聯(lián)用順鉑對(duì)SKOV-3及SKOV-3/DDP細(xì)胞系具有協(xié)同生長(zhǎng)抑制作用,這種協(xié)同作用尤其是在使用小劑量鬼臼苦素和順鉑時(shí)較敏感,表明鬼臼苦素能增加SKOV-3及SKOV-3/DDP細(xì)胞系對(duì)順鉑的敏感性,聯(lián)合用藥時(shí),達(dá)到相同療效的情況下,可以減少化療藥物的用量.(4)鬼臼苦素能夠拮抗胰島素樣生長(zhǎng)因子-1促腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)作用,同時(shí)還能拮抗胰島素樣生長(zhǎng)因子-1促腫瘤細(xì)胞胰島素樣生長(zhǎng)因子-1受體磷酸化作用