多西環(huán)素對(duì)上皮性卵巢癌的抗腫瘤作用及機(jī)制的研究.pdf

1、背景介紹:卵巢癌是婦科常見的惡性腫瘤，死亡率居?jì)D科腫瘤之首，5年生存率僅為30％左右。由于缺乏有效的篩查手段，70％卵巢癌患者診斷時(shí)已屬晚期，無法以手術(shù)根除治療。目前針對(duì)卵巢癌主要的治療方案為手術(shù)及術(shù)后輔以鉑類聯(lián)合紫杉醇為主的化療。60％-80％的患者在接受積極的治療后能獲得臨床完全緩解，然而晚期患者中的70％將最終復(fù)發(fā)并表現(xiàn)為鉑類耐藥。絕大多數(shù)的鉑類耐藥性卵巢癌是不能治愈的，其平均生存期約為2年左右。而目前針對(duì)鉑類耐藥性卵巢癌的治療國

2、內(nèi)外尚無統(tǒng)一方案，所以尋找一種安全有效的，對(duì)卵巢癌尤其是鉑類耐藥性卵巢癌具有明確治療效果的化療藥物十分有必要。多西環(huán)素(Doxycycline，DC)是一種四環(huán)素族廣譜抗生素，臨床上主要用于感染性疾病的治療，近年來有研究顯示，多西環(huán)素除了抗菌作用外還有一定的抗腫瘤作用，但其具體的抗腫瘤機(jī)制目前尚不清楚，而多西環(huán)素用于治療卵巢癌的研究國內(nèi)外未見報(bào)道。
　　 方法:
　　 在本次實(shí)驗(yàn)中，我們采用MTT方法、流式細(xì)胞儀分析及細(xì)

3、胞侵襲實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)多西環(huán)素對(duì)卵巢癌增殖、凋亡及侵襲的抑制作用;western-bolt方法及ELISA等方法探索多西環(huán)素對(duì)順鉑敏感性(SKOV3)及耐藥性(SKOV3/DDP)卵巢癌細(xì)胞的抗腫瘤作用及可能機(jī)制。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，通過裸鼠腹腔卵巢癌模型的建立，觀察多西環(huán)素對(duì)腫瘤生長的抑制作用。
　　 結(jié)果:
　　 實(shí)驗(yàn)證實(shí)多西環(huán)素可以抑制順鉑敏感性及耐藥性卵巢癌細(xì)胞的增殖及侵襲，可以在一定程度上誘導(dǎo)順鉑耐藥卵巢癌細(xì)胞凋亡。在順

4、鉑敏感性卵巢癌細(xì)胞株中，多西環(huán)素可以抑制其SDF-1分泌，CXCR4，MMP-2，MMP-9的表達(dá)及Akt，ERK的磷酸化。SDF-1可以誘導(dǎo)順鉑敏感性卵巢癌細(xì)胞株中Akt及ERK磷酸化增加，這一效應(yīng)可以被多西環(huán)素所抑制。而在順鉑耐藥性卵巢癌細(xì)胞株中，我們幾乎未檢測(cè)到SDF-1的分泌及MMP-2及MMP-9的表達(dá)，多西環(huán)素對(duì)SDF-1特異性受體CXCR4的抑制率也明顯小于其對(duì)順鉑敏感細(xì)胞株中CXCR4的抑制率。SDF-1可以誘導(dǎo)順鉑耐藥

5、性卵巢癌細(xì)胞株中ERK磷酸化增加，但多西環(huán)素對(duì)這一效應(yīng)無抑制作用，且SDF-1對(duì)Akt的磷酸化無增強(qiáng)作用。而后，我們對(duì)比了兩株細(xì)胞株中Akt，ERK，CXCR4及caspase-3的表達(dá)情況，結(jié)果顯示caspase-3的表達(dá)水平在順鉑耐藥株中明顯較敏感株中低，而多西環(huán)素作用后順鉑耐藥性卵巢癌細(xì)胞株中caspase-3的表達(dá)量明顯增加。此外，通過對(duì)裸鼠卵巢癌腹腔模型的建立來觀察多西環(huán)素對(duì)在體卵巢癌的抑制作用，結(jié)果顯示在造模成功后連續(xù)腹腔注

6、射7天多西環(huán)素可以顯著抑制卵巢癌腹腔腫瘤的生長及惡性腹水的形成。
　　 結(jié)論:
　　 綜上所訴，本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了多西環(huán)素具有明顯的抗卵巢癌作用，其對(duì)順鉑敏感性卵巢癌的抑制可能是通過SDF-1/CXCR4軸介導(dǎo)的Akt及ERK磷酸化改變從而激活下游相關(guān)信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)，而在順鉑耐藥性卵巢癌細(xì)胞株中，多西環(huán)素對(duì)caspase-3表達(dá)的上調(diào)作用可能是其發(fā)揮抗腫瘤作用的主要機(jī)制。此次研究將為多西環(huán)素用于卵巢癌的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，具有重要