2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察金雀異黃素(Genistein,Gen)衍生物5,4’-二-正辛烷氧基-7-二氟亞甲基異黃酮(5,4’-Di-n-octoxyl-7-gem-Difluoromethylene-genisteinin DodFMG)抑制人乳腺癌MCF-7細胞生長和誘導凋亡作用;探討DodFMG的作用機制是否涉及上調(diào)PTEN、抑制Akt磷酸化、激活caspase-3。
  方法:體外培養(yǎng)人乳腺癌MCF-7細胞,MTT比色法測定細胞增殖活性

2、;平皿集落形成法檢測細胞錨定依賴性生長;瓊脂糖凝膠電泳法觀測細胞凋亡;Western Blot法檢測細胞PTEN-Akt途徑相關蛋白PTEN、pAkt、caspase-3的表達。
  結果:MTT比色法測定結果顯示DodFMG(3.0、10.0、30.0μmol/L)和Gen30.0μmol/L分別處理48小時,人乳腺癌MCF-7細胞增殖相對抑制率分別為27.76%,49.13%,65.71%和55.38%,其IC50值為11.3

3、6μmol/L,DodFMG(30.0μmol/L)的細胞增殖相對抑制率(65.71%)較同濃度的先導化合物金雀異黃素(Gen)的細胞增殖相對抑制率(55.38%)高,表明DodFMG對MCF-7細胞的增殖有明顯的抑制作用,呈劑量依賴性,與金雀異黃素(Gen)比較具有更強的抗腫瘤活性。平皿集落形成法結果顯示:DodFMG(3.0、10.0、30.0μmol/L)和Gen30.0μmol/L分別處理48小時,人乳腺癌 MCF-7細胞的集落

4、抑制率分別為36.23%,54.13%,74.08%和59.63%,IC50值為9.03μmol/L。DodFMG(30.0μmol/L)的細胞集落抑制率(74.08%)較同濃度的先導化合物金雀異黃素(Gen)的細胞集落抑制率(59.63%)高(P<0.05)。DNA凝膠電泳法結果顯示:DodFMG(3.0、10.0、30.0μmol/L)和金雀異黃素GEN(30.0μmol/L)分別處理人乳腺癌MCF-7細胞,DodFMG(10.0、

5、30.0μmol/L)處理人乳腺癌MCF-7細胞48小時,瓊脂糖凝膠電泳出現(xiàn)典型的“梯形”DNA條帶,而相應濃度的先導化合物GEN(30.0μmol/L)處理人乳腺癌MCF-7細胞48小時,瓊脂糖凝膠電泳未出現(xiàn)典型的“梯形”DNA條帶,表明 DodFMG具有誘導人乳腺癌MCF-7細胞凋亡的作用。Western Blot分析結果顯示: DodFMG(3.0、10.0、30.0μmol/L)處理人乳腺癌MCF-7細胞24h后, PTEN和c

6、aspase-3的表達較溶媒對照組分別上調(diào)15.06%、31.67%、45.63%和11.22%、26.80%、36.73%。pAkt的表達分別下調(diào)8.34%、27.50%、39.77%。DodFMG30.0μmol/L分別處理6、12、24h后,PTEN和caspase-3的表達較溶媒對照組分別上調(diào)10.41%、25.64%、50.45%和9.10%、16.62%、37.00%。pAkt的表達分別下調(diào)9.33%、27.50%、61.1

7、9%。這表明DodFMG以時間-劑量依賴方式引起PTEN和caspase-3的上調(diào)和pAkt的下調(diào),與先導化合物Gen比較,DodFMG更為有效(P<0.05)。
  結論:(1)DodFMG具有抑制體外培養(yǎng)人乳腺癌MCF-7細胞增殖和生長作用,呈劑量依賴性。
  (2)DodFMG具有誘導人乳腺癌MCF-7細胞凋亡作用。
  (3)DodFMG抑制人乳腺癌MCF-7細胞生長和誘導凋亡作用可能與上調(diào)PTEN、抑制Akt

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