β-乳球蛋白與表沒食子兒茶素沒食子酸酯制備納米粒及其抗腫瘤活性研究.pdf

1、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)作為綠茶葉含量最多且起主要生理功能的茶多酚，其具有抗氧化、抗誘變、抗菌，抗病毒、減肥等活性，對癌癥、心血管疾病、糖尿病、炎癥等也具有很好的治療作用。然而EGCG性質(zhì)很不穩(wěn)定，具有較低的生物利用率，這些缺陷嚴(yán)重限制了該物質(zhì)在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域的應(yīng)用。納米技術(shù)作為一種行之有效的方法可以保護芯材免于遭受環(huán)境的破壞，其作為高效的藥物載體，具有位點特異性，不易產(chǎn)生多重抗藥性等特點，其在疾病防治中具有重要的作用。β

2、-乳球蛋白是由反芻動物乳腺上皮細(xì)胞分泌的重要的水溶性乳清蛋白，可以作為一種優(yōu)良的納米載體與白藜蘆醇、姜黃素、ω-3多不飽和脂肪酸相結(jié)合以提高其穩(wěn)定性和生物利用率。
　　 本文以β-LG為納米載體，與EGCG制備了β-LG-EGCG納米粒，研究其對EGCG抗氧化活性的保護作用及抗腫瘤活性的增效作用。研究發(fā)現(xiàn)溶液不同pH(2.5-7.0)，β-LG的不同加熱溫度(30-85℃)，β-LG/EGCG不同摩爾比例(1∶2-1∶32)以及

3、蛋白濃度(1-10mg/mL)對β-LG-EGCG納米粒的粒徑、Zeta電位、包埋率及載藥量具有顯著影響。當(dāng)pH值為6.4-7.0，熱激溫度為70-85℃，β-LG與EGCG可以形成穩(wěn)定，澄清及高載藥量的納米分散體。運用紅外光譜技術(shù)分析發(fā)現(xiàn)β-LG-EGCG納米粒與β-LG具有相似的二級結(jié)構(gòu)，熱誘導(dǎo)沒有破壞蛋白的二級結(jié)構(gòu)。利用透射電鏡觀察β-LG-EGCG納米粒及β-LG呈白色球狀結(jié)構(gòu)。中性條件，β-LG/EGCG摩爾比例為1∶2，熱激

4、溫度85℃，β-LG對EGCG的緩釋效果及EGCG的抗氧化活性保護作用較好。通過體內(nèi)及體外實驗評價不同條件制備的β-LG-EGCG納米粒(LENP1，LENP2，LENP3，LENP4，LENP5，LENP6，LENP7)的抗腫瘤活性。相對于等劑量的自由EGCG，ELNP3和ELNP6能夠顯著增加小鼠肝癌細(xì)胞株H22細(xì)胞及荷瘤小鼠的腫瘤抑制率。此外，ELNP6能夠顯著提高荷瘤小鼠的胸腺指數(shù)及脾指數(shù)。本研究結(jié)果表明，β-LG可作為納米載體