慶大霉素損傷后前庭上皮細胞增殖凋亡信號轉導機制的研究.pdf

1、目的:觀察慢性慶大霉素中毒后豚鼠前庭上皮的損傷和修復過程,探討前庭毛細胞凋亡和再生的關系;研究慶大霉素慢性損傷后豚鼠前庭終器蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)Cα、Cβ亞型的表達和蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)活性的變化及其βⅠ、βⅡ、γ亞型的表達,探討PKA、PKC與前庭損傷修復的關系;方法:1.采用末端脫氧核苷酸轉移酶介導的dUTP缺口末端標記(terminal deoxynucleoti

2、dyl transferase-mediated deoxyuridine tripho-sphate nick end labeling,TUNEL)法觀察前庭感覺上皮細胞的凋亡,采用5-溴脫氧尿核苷(bromodeoxyuridine,Brdu)免疫細胞化學法觀察前庭上皮的修復過程.2.采用免疫細胞化學法觀察橢圓囊斑、球囊斑和壺腹嵴PKACα、Cβ亞型的表達變化及分布特點.3.采用免疫細胞化學法觀察橢圓囊斑、球囊斑和壺腹嵴PKCβ<

3、,Ⅰ,Ⅱ>、γ亞型的表達變化及分布特點:應用<'32>γ-P示蹤檢測前庭終器PKC活性的變化. 結論: 1.慢性慶大霉素耳中毒后豚鼠前庭上皮細胞凋亡增加,凋亡與增殖伴隨存在,前庭上皮細胞的凋亡可能是其增殖的觸發(fā)因素.增殖過程表現為支持細胞增生向毛細胞增生移行的趨勢,支持細胞增殖并轉化成毛細胞可能是前庭上皮細胞損傷修復機理之一. 2.慶大霉素慢性中毒后豚鼠前庭感覺上皮PKCβ<,Ⅰ>、γ亞型表達及PKC活牲均發(fā)生變化,且不同亞型抗原分布不