槲皮素對人腎小管上皮細胞表達協(xié)同刺激分子B7RP-1影響的實驗研究.pdf

1、目的：本研究旨在觀察槲皮素(quercetin)對人腎小管上皮細胞株HK-2表達協(xié)同刺激分子B7RP-1的影響，探討槲皮素對腎小球腎炎發(fā)生、發(fā)展過程中細胞免疫的影響，更深入的了解槲皮素對腎臟具有保護作用的機制。同時也為腎炎性疾病的治療提供新的思路。 方法：體外培養(yǎng)人腎小管上皮細胞株(HK-2)，給予不同濃度的槲皮素和相應干預因素，采用四甲基偶氮鹽滲入法(MTT法)檢測細胞增殖情況；采用細胞免疫熒光(IF)方法和逆轉錄聚合酶鏈反應

2、(RT-PCR)分別檢測槲皮素對腫瘤壞死因子α(TNF-α)誘導下協(xié)同刺激分子B7RP-1和B7RP-1mRNA表達的影響。 結果： 1．槲皮素對HK-2增殖的影響在5～15umol/L濃度范圍內，觀察槲皮素以不同劑量干預腎小管上皮細胞不同時間(12～60小時)對HK-2的增殖的影響。結果較小劑量實驗組與對照組之間，各實驗組之間差異均無顯著意義(P>0.05)；較大劑量槲皮素(15umol/l)可以抑制HK-2的增殖(P

3、<0.05)。 2．不同劑量槲皮素對TNF-α誘導HK-2表達B7RP-1的影響以不同濃度(5～15umol/L)槲皮素干預HK-2細胞24小時，結果B7RP-1的表達較陽性及正常對照組加強，各實驗組與對照組之間差異有顯著意義(P<0.05)。表明槲皮素可上調腎小管上皮細胞表達B7RP-1。 3．同一劑量槲皮素干預不同時間對TNF-α誘導HK-2表達B7RP-1的影響腎小管上皮細胞以槲皮素(10umol/L)處理12～6

4、0小時后，經細胞免疫熒光染色觀察B7RP-1的表達情況，結果B7RP-1的表達先增強后減弱，表達最強在48小時處，差異有統(tǒng)計學意義，且存在線性關系(P<0.05)。 4．不同劑量槲皮素對TNF-α誘導下HK-2表達B7RP-1mRNA的影響以不同濃度(5～15umol/L)槲皮素干預HK-2細胞24小時，結果B7RP-1mRNA的表達較陽性及正常對照組加強，各實驗組與對照組之間差異有顯著意義(P<0.05)。表明槲皮素可從基因水

5、平上調腎小管上皮細胞表達B7RP-1。 5．同一劑量槲皮素干預不同時間對TNF-α誘導下HK-2表達B7RP-1mRNA的影響。 腎小管上皮細胞以槲皮素(10umol/L)處理6～60小時后，經RT-PCR檢測B7RP-1mRNA的表達情況，結果B7RP-1mRNA的表達先增強后減弱，表達最強在24小時處，差異有統(tǒng)計學意義，且存在線性關系(P<0.05)。 結論：<1>在排除槲皮素對腎小管上皮細胞增殖的影響后，槲