基因突變敏感性分子開關(guān)在肺癌EGFR基因突變檢測(cè)中的應(yīng)用研究.pdf

1、南華大學(xué)碩士學(xué)位論文基因突變敏感性分子開關(guān)在肺癌EGFR基因突變檢測(cè)中的應(yīng)用研究姓名：肖莉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：藥理學(xué)指導(dǎo)教師：李凱廖端芳200705012退火溫度提高而增強(qiáng)。重組質(zhì)粒定量后，稀釋成108、107、106、105、104、103、102、101拷貝數(shù)l濃度梯度作為陽性模板，顯示敏感性分子開關(guān)在普通PCR結(jié)合凝膠成像電泳中，15nt缺失突變檢測(cè)分子開關(guān)可檢測(cè)的起始拷貝數(shù)為3000突變分子，而18nt缺失突變檢測(cè)分子開關(guān)敏

2、感性更高，可檢測(cè)的起始拷貝數(shù)為10突變分子。對(duì)照組中，采用TaqDNA聚合酶或3’末端無硫代修飾的特異性引物，均易產(chǎn)生假陽性且呈退火溫度依賴性。將上述15nt缺失突變陽性模板用于制定熒光定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果顯示，定量曲線循環(huán)閾值與模板濃度具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.990。對(duì)6例非小細(xì)胞性肺癌患者的肺組織樣本進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)1例含有15nt缺失突變。由于該標(biāo)本體細(xì)胞突變含量較少，低于實(shí)際序列分析所檢測(cè)范圍的敏感度。結(jié)論：結(jié)論：