乳鐵蛋白抗輻射損傷作用的基礎(chǔ)研究.pdf

1、目的:
　　 隨著核技術(shù)的迅速發(fā)展，電離輻射的應(yīng)用已經(jīng)發(fā)展到各個(gè)領(lǐng)域。工業(yè)、科研和醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域使用的X射線探傷機(jī)、放射性同位素、X射線機(jī)、直線加速器等，一旦造成事故就會(huì)給人體造成不同程度的損傷。人體的多個(gè)系統(tǒng)如造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)對(duì)電離輻射非常敏感。因此，人體長(zhǎng)期或者大劑量接受電離輻射，會(huì)引起細(xì)胞、組織和器官損傷，誘發(fā)各種疾病，誘發(fā)癌癥、白血病，甚至引起死亡。乳鐵蛋白是一種非血紅素鐵結(jié)合性糖蛋白，廣泛分布于哺乳動(dòng)物的乳汁、

2、唾液、淚液等分泌物和血液、嗜中性粒細(xì)胞中。乳鐵蛋白已在多個(gè)領(lǐng)域表現(xiàn)出特有的生物活性，如促進(jìn)腸道鐵吸收、抑菌與殺菌、抗氧化作用、免疫調(diào)節(jié)作用、促進(jìn)腸道內(nèi)雙歧桿菌生長(zhǎng)功能、抗感染作用、抗癌作用、藥物協(xié)同作用。2006年，日本研究人員通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，乳鐵蛋白具有防止輻射損傷的功效，并認(rèn)為這種作用與乳鐵蛋白的抗氧化作用有關(guān)。本課題通過(guò)研究乳鐵蛋白對(duì)輻射損傷小鼠抗氧化、免疫功能、細(xì)胞凋亡等的影響，進(jìn)一步探討乳鐵蛋白對(duì)小鼠的抗輻射損傷作用及可能存

3、在的機(jī)制，為研究新型放射防護(hù)劑提供新的思路和方法。
　　 方法:
　　 首先研究乳鐵蛋白對(duì)小鼠輻射損傷的防護(hù)作用。36只SPF級(jí)Balb/c小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，觀察無(wú)異常后參照隨機(jī)區(qū)組法分組，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、照射對(duì)照組和hLF組，每組12只，照射對(duì)照組和hLF組給予2 GyX射線全身照射。照射后hLF組每只小鼠腹腔注射4.0 mg/ml的乳鐵蛋白溶液1.0 ml;正常對(duì)照組和照射對(duì)照組腹腔注射0.9％氯化鈉注射液各1

4、.0 ml，各組小鼠自由飲食。照射后24 h，處死小鼠取材，檢測(cè)免疫器官指數(shù)、T淋巴細(xì)胞亞群比例、血清SOD活力、MDA水平、外周血象。另取Balb/c小鼠30只，分組、照射、給藥及飲食方式同上述實(shí)驗(yàn)。給藥20 h后，每組小鼠腹腔注射體積分?jǐn)?shù)為5％雞紅細(xì)胞懸液1.0 ml，4h后，取材，檢測(cè)腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能。
　　 第二是研究乳鐵蛋白對(duì)脾細(xì)胞凋亡和細(xì)胞因子的影響。取Balb/c小鼠30只，分組同上述實(shí)驗(yàn)。hLF組按50 mg

5、/kg hLF灌胃給藥，1次/d，連續(xù)7d;正常對(duì)照組和照射對(duì)照組灌胃0.9％氯化鈉注射液，20 ml/kg，1次/d，共7d。末次給藥后2h，照射對(duì)照組和hLF組給予2 GyX射線全身照射，各組小鼠自由飲食。照射后24 h，處死小鼠取材，檢測(cè)脾細(xì)胞凋亡、血清Bcl-2、IL-1β、IL-2。
　　 結(jié)果:
　　 乳鐵蛋白對(duì)小鼠輻射損傷的防護(hù)作用實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，照射后，照射對(duì)照組和hLF組小鼠與正常對(duì)照組比較，小鼠胸

6、腺和脾臟指數(shù)、CD8+淋巴細(xì)胞比例、SOD活力、WBC、LYM％、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)和吞噬百分率均顯著降低(P＜0.01)，而MDA水平、CD4+淋巴細(xì)胞比例均顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01); hLF組小鼠脾臟和胸腺指數(shù)、CD4+、CD8+淋巴細(xì)胞比例、SOD活力、LYM％、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)和吞噬百分率明顯高于照射對(duì)照組（P＜0.01，P＜0.05），而MDA水平顯著低于照射對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。<

7、br>　　 乳鐵蛋白對(duì)脾細(xì)胞凋亡和細(xì)胞因子的影響實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，照射后，小鼠脾細(xì)胞凋亡增多，照射對(duì)照組小鼠脾細(xì)胞凋亡的細(xì)胞比例（包括早期凋亡細(xì)胞和晚期凋亡細(xì)胞）顯著高于正常對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); hLF組小鼠脾細(xì)胞凋亡細(xì)胞的比例正常對(duì)照組有所升高，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);hLF組小鼠脾細(xì)胞凋亡細(xì)胞的比例顯著低于照射對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。hLF組小鼠血清Bcl-2、IL-1β、IL

8、-2濃度顯著高于照射對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。
　　 結(jié)論:
　　 1.免疫器官指數(shù)計(jì)算結(jié)果提示乳鐵蛋白可能能夠防止電離輻射引起的胸腺和脾臟的過(guò)度損傷并促進(jìn)其恢復(fù)。
　　 2.脾臟T淋巴細(xì)胞亞群和腹腔巨噬細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)證實(shí)乳鐵蛋白對(duì)電離輻射引起的免疫功能損傷具有保護(hù)作用。
　　 3.抗氧化實(shí)驗(yàn)的結(jié)果提示乳鐵蛋白可提高電離輻射損傷后小鼠機(jī)體內(nèi)清除自由基的能力和抗氧化能力。
　　 4.乳