慢乙肝患者外周血樹(shù)突細(xì)胞亞群變化特點(diǎn)及中西醫(yī)結(jié)合治療對(duì)其影響的研究.pdf

1、目的：探討慢性乙型肝炎(chronichepatitisB,CHB)患者HBeAg血清學(xué)表達(dá)及HBVDNA復(fù)制對(duì)外周血樹(shù)突細(xì)胞亞群(dendriiccells,DCs)的影響，并觀察復(fù)方黃芪顆粒和/或拉米夫定治療CHB不同療程外周血DCs數(shù)量與功能變化的特點(diǎn)，分析其與臨床療效的關(guān)系，進(jìn)一步探討外周血DCs在CHB發(fā)病機(jī)制中的作用，為臨床制定更佳治療方案提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：(1)應(yīng)用三色流式細(xì)胞分析儀檢測(cè)29例HBeAg陽(yáng)性、12例HBe

2、Ag陰性CHB患者和46例健康人的外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheralbloodmononuclearcells,PBMCs)中的DCs百分比；利用淋巴細(xì)胞液密度梯度血細(xì)胞分離法分離出PBMCs，體外加入CpG2216、IL-3、PolyI：C刺激劑共培養(yǎng)24h后，通過(guò)ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清中細(xì)胞因子IFN-a、IL-12產(chǎn)生情況，從而初步了解乙肝病毒(HepatitisBvirus，HBV)血清學(xué)標(biāo)志物HBeAg的表達(dá)情況與DCs

3、數(shù)量和功能的關(guān)系。(2)同上法檢測(cè)HBeAg陽(yáng)性者中15例HBVDNA定量＞107拷貝/mL、14例107拷貝/mL＞HBVDNA定量＞104拷貝/mL的CHB患者和46例健康人外周血DCs亞群頻率、功能，分析慢乙肝患者外周血病毒復(fù)制活躍程度與DCs數(shù)量和功能的關(guān)系。(3)29例HBeAg陽(yáng)性的CHB患者分別給予復(fù)方黃芪顆粒和/或拉米夫定治療，在治療0、2、4、12、24、36、48周檢測(cè)生化指標(biāo)、HBVDNA定量、乙肝抗原抗體五項(xiàng)、外

4、周血DCs的頻率及功能。結(jié)果：(1)經(jīng)PolyI：C、CpG2216、IL-3刺激，慢乙肝患者外周血髓系樹(shù)突細(xì)胞(Myeloiddendriticcells，mDCs)和漿細(xì)胞樣樹(shù)突細(xì)胞(Plasmacytoiddendriticcells，pDCs)分泌IL-12和IFN-α的產(chǎn)量，均明顯低于健康對(duì)照組，P＜0.05，HBeAg陽(yáng)性表達(dá)與陰性之間無(wú)顯著差異。外周血mDCs頻率有HBeAg陰性組＞健康對(duì)照組＞HBeAg陽(yáng)性組趨勢(shì)，P＞0

5、.05；外周血pDCs頻率有健康對(duì)照組＞HBeAg陰性組＞HBeAg陽(yáng)性組趨勢(shì)，P＞0.05。(2)HBeAg陽(yáng)性而HBVDNA水平不同的慢乙肝患者，mDCs頻率與健康對(duì)照組無(wú)顯著差異，分泌IL-12產(chǎn)量：高復(fù)制組＜低復(fù)制組＜健康對(duì)照組，P＜0.01；pDCs頻率、pDCs分泌IFN-α產(chǎn)量，低復(fù)制組、高復(fù)制組均明顯低于健康對(duì)照組，P＜0.05，低復(fù)制組、高復(fù)制組之間對(duì)比，有高復(fù)制組＞低復(fù)制組趨勢(shì)，P＞0.05。(3)治療12周、24周

6、、48周時(shí)，復(fù)方黃芪顆粒與拉米夫定聯(lián)合治療組HBVDNA陰轉(zhuǎn)率分別為87.50％(7/8例)、77.78％(7/9例)、71.43％(5/7例)，HBeAg陰轉(zhuǎn)率分別為75.00％(6/8例)、88.89％(8/9例)、100％(7/7例)，高于2者的單一藥物治療組，P＞0.05。隨療程增加，3組mDCs、pDCs數(shù)量均呈波動(dòng)上升趨勢(shì)，P＞0.05。3組治療早期(4～12周)IL-12產(chǎn)量均達(dá)高峰，之后呈緩慢下降趨勢(shì)，P＞0.05。3組

7、治療第2周IFN-α產(chǎn)量均有明顯下降，治療一段時(shí)間后恢復(fù)產(chǎn)量并達(dá)高峰，再緩步下降。結(jié)論：慢乙肝炎患者外周血DCs功能明顯下降，與HBeAg血清學(xué)表達(dá)似無(wú)相關(guān)性，而HBVDNA復(fù)制水平高時(shí)，DCs功能下降更為明顯。復(fù)方黃芪顆粒聯(lián)合拉米夫定治療較單用復(fù)方黃芪顆粒或拉米夫定治療療效明顯且持久，兩藥聯(lián)合彼此提高了對(duì)HBeAg和HBVDNA的抑制效果，起到了互補(bǔ)與協(xié)同作用，并可以促進(jìn)外周血DCs亞群數(shù)量及功能恢復(fù)，為臨床制定抗乙肝病毒治療方案開(kāi)辟