轉(zhuǎn)基因小鼠髓母細(xì)胞瘤的鑒定及發(fā)病機(jī)理的初步研究.pdf

1、SimianVirus40(SV40)屬于多瘤病毒屬，其早期基因編碼產(chǎn)物大T抗原(SV40Tag)具有致癌性。流行病學(xué)發(fā)現(xiàn)，人的腦瘤組織中能檢測到SV40病毒基因組序列。其中，髓母細(xì)胞瘤是最常見的兒童中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，是一種小腦神經(jīng)外胚層腫瘤，發(fā)病率約占兒童腦腫瘤的25％，死亡率排在腫瘤疾病之首。然而，SV40在該腫瘤發(fā)生中所扮演的具體角色和確切機(jī)制還不清楚。 目前已發(fā)現(xiàn)，SHH，Wnt，Notch，erbB-2和IGF等多種信

2、號(hào)通路分子的變化與該病的形成有關(guān)。在成功構(gòu)建了pTet-on、pTRE2-SV40Tag轉(zhuǎn)基因小鼠腦腫瘤模型的基礎(chǔ)上我們通過組織病理學(xué)、分子標(biāo)記和免疫組織化學(xué)分析證明該腫瘤為源自小腦的髓母細(xì)胞瘤。之后利用基因芯片和real-timePCR等方法對該模型的基因表達(dá)變化情況進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，SHH和Wnt通路的變化不顯著，而IGF通路則有明顯的變化。 為方便進(jìn)一步研究髓母細(xì)胞瘤的分子機(jī)制和信號(hào)通路，我們利用小鼠腦瘤組織成功建立了小

3、鼠髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系，在此基礎(chǔ)上通過免疫組化和免疫熒光實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)IGF通路中的IRS-1在細(xì)胞中位置發(fā)生變化，由細(xì)胞質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞核，并且與SV40Tag在細(xì)胞中的位置一致。結(jié)合基因芯片及real-timePCR結(jié)果，推測SV40Tag可以通過影響IGF通路中IRS-1表達(dá)量及位置的變化，促進(jìn)腫瘤發(fā)生。 綜上，本研究對pTet-on、pTRE2-SV40Tag轉(zhuǎn)基因小鼠髓母細(xì)胞瘤的基因表達(dá)譜進(jìn)行篩查，結(jié)果表明SV40Tag的表達(dá)可通過