常染色體隱性遺傳家族性局灶節(jié)段性腎小球硬化的臨床和基因研究.pdf

1、目的:研究常染色體隱性遺傳家族性局灶節(jié)段性腎小球硬化(familial focalsegmental glomerulosclerosis，F(xiàn)FSGS)的臨床和基因的異質(zhì)性。 方法:1個(gè)中國(guó)皖北地區(qū)3代FFSGS家系(Han2005)，采集本家系中25名成員的外周血樣，選擇位于1q25-31上的10微衛(wèi)星標(biāo)記(microsatellitemarkers)：D19S49、D1S452、D1S242、D1S416、D1S240、D1

2、S254、D1S202、D1S222、D1S238和D1S413，應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase chain reaction，PCR)得到擴(kuò)增產(chǎn)物片斷，采用ABI PRISM<'TM>310 Genetic Analyze測(cè)定PCR產(chǎn)物片段大小。利用Genescan軟件(3.1版)、Genetyper(3.7版)處理后得到檢測(cè)片段大小，根據(jù)相應(yīng)微衛(wèi)星標(biāo)記的產(chǎn)物片斷大小不同，得到每個(gè)樣本的基因型。對(duì)基因型數(shù)據(jù)進(jìn)行校對(duì)后，用連鎖

3、分析軟件LINKAGE的MLINK程序計(jì)算每個(gè)標(biāo)記的兩點(diǎn)間LOD(log odds)值，用LINK-MAP程序計(jì)算多點(diǎn)問(wèn)LOD值，根據(jù)兩點(diǎn)和多點(diǎn)間LOD值判斷連鎖關(guān)系。然后將Han2005與Martin等研究的FS-W家族進(jìn)行相關(guān)比較，以尋找它們的發(fā)病差異。 結(jié)果:連鎖分析結(jié)果顯示所有微衛(wèi)星標(biāo)記兩點(diǎn)間LOD值在不同重組率時(shí)均小于0，所有LOD值在重組率為O。0時(shí)均小于-2，說(shuō)明該FFSGS家系疾病基因與1q25-31區(qū)域沒(méi)有連鎖

4、關(guān)系，多點(diǎn)D1416、D1S254、D12s02、D1S238和D1S413間LOD值也均小于-2，結(jié)果進(jìn)一步排除疾病基因位于1q25-31的D1S416至D1S413之問(wèn)的19cM的區(qū)f剛內(nèi)；把Han2005與FS-W家族比較后發(fā)現(xiàn)，兩個(gè)家族存在臨床和基因的異質(zhì)性。 結(jié)論:Han2005家系的疾病基因與已報(bào)道的FFSGS定位區(qū)域(1q25-31區(qū)域)沒(méi)有連鎖關(guān)系；Han2005符合常染色體隱性遺傳；常染色體隱性遺傳FFSGS存