嗅質丁香酚改善嗅覺認知及其機制的探討.pdf

1、目的：嗅質或氣味能通過嗅覺通路影響腦功能。通過神經行為學觀察確定嗅質丁香酚(EG)可以改善C57BL/6對EG的嗅覺認知能力；在此基礎上研究EG干預后小鼠嗅上皮嗅覺受體(ORs)mOR-EG的基因表達變化，及通過EG干預體外嗅覺感覺神經元(OSNs)的培養(yǎng)，對OSNs的mOR-EG的基因表達變化進行檢測。探討嗅質改善嗅覺認知及其機制。 方法： EG干預小鼠從出生開始(PNDO)分別至6w和10w，對EG 6w和6w對照組

2、，EG 10w組和10w對照組。然后進行嗅質偏愛和嗅質辨識實驗，檢測小鼠對EG的嗅覺認知的變化；通過Real-time PCR技術，比較EG 6w和6w對照組，EG 10w和10w對照組的嗅上皮mOR.EG的基因表達差異，對mOR-EG基因變化與EG的嗅覺認知行為學之間可能的聯(lián)系進行探討；利用OMP和TUJ-1的免疫細胞化學和RT-PCR.實驗對體外培養(yǎng)的OSNs進行鑒定，后利用30μm，100μm和300μm EG分別干預OSNs培養(yǎng)

3、，再通過Real-time PCR技術對各組mOR-EG的基因表達進行檢測，對EG改善嗅覺認知的機制進一步探討。 結果： 1.EG 6w和6w對照組，EG 10w和10w對照組神經行為學結果之間的比較，EG6w組對EG的嗅覺辨識時間明顯快于6w對照組，EG 10w組對EG的嗅覺辨識時間亦明顯快于6w對照組； 2.Real-time PCR技術對上述各組嗅上皮mOR-EG的基因表達差異檢測，發(fā)現EG 6w組的mOR

4、-EG基因表達量明顯高于6w對照組，EG 10w組的mOR-EG基因表達量明顯高于10w對照組，且EG 6w組和EG 10w組的mOR-EG基因表達量約為相應對照組的9倍； 3.經OMP和TUJ-1的免疫細胞化學和RT-PCR鑒定，體外培養(yǎng)的多數細胞為OSNs。EG不同濃度干預OSNs的培養(yǎng)后，Real-time PCR檢測各組mOR-EG基因表達量，發(fā)現30μm EG和100μG組的mOR-EG基因表達量明顯高于空白對照組，分