丹酚酸B對內(nèi)皮細胞保護作用的蛋白組學(xué)研究.pdf

1、治療心血管疾病的傳統(tǒng)中藥丹參中一個主要抗氧化水溶性成份-丹酚酸B(Sal B)對血管細胞有多重保護作用。為了闡述Sal B對內(nèi)皮細胞EA.Hy926氧化損傷保護作用的機理，本研究在建立Sal B對EA.Hy926細胞氧化損傷保護模型的基礎(chǔ)上，運用16O/18O標記比較蛋白組學(xué)方法，對①正常培養(yǎng)細胞：②Sal B預(yù)處理后再用H2O2損傷的細胞；③直接用H2O2損傷的細胞中可溶性蛋白的表達情況進行比較研究。 共鑒定出125個可溶性蛋

2、白，其中9個蛋白在三種不同情況下發(fā)生了顯著變化。其中7個蛋白分別屬于細胞轉(zhuǎn)錄翻譯調(diào)節(jié)因子、細胞凋亡路徑的抑制劑和細胞防御體系，它們的變化情況可以解釋Sal B的保護作用機制。在轉(zhuǎn)錄翻譯調(diào)節(jié)因子表達方面：細胞經(jīng)Sal B預(yù)處理后再受到氧化損傷時，與正常培養(yǎng)的細胞及直接受到氧化損傷的細胞相比，轉(zhuǎn)錄翻譯調(diào)節(jié)因子eIF4A-1和hnRNPA2/hnRNPB1的表達量明顯上調(diào)。在細胞凋亡途徑蛋白方面：①細胞凋亡路徑Rho路徑的抑制劑-Rho GD

3、P inhibitor 表達量在細胞經(jīng)Sal B預(yù)處理后再受到氧化損傷時，與正常培養(yǎng)細胞及直接受到氧化損傷的細胞相比明顯上調(diào)，Rho GDPinhibitor的上調(diào)有助于抑制細胞受到氧化損傷時Rho凋亡路徑的啟動；②Caspase-3、Caspase-9的抑制劑HMBG1的表達量在細胞直接受到氧化損傷時與正常細胞相比明顯上調(diào)，而經(jīng)Sal B預(yù)處理其上調(diào)程度明顯增加，HMBG1的上調(diào)有助于抑制凋亡路徑中的最終凋亡執(zhí)行分子Caspase酶的

4、活性進而阻止細胞走向凋亡。在細胞防御體系蛋白表達方面：①細胞防御體系中的熱休克蛋白HspB1和Hip在受到氧化損傷的條件下表達量均上調(diào)，而經(jīng)Sal B預(yù)處理這兩個蛋白的上調(diào)程度明顯增加；②維持細胞自身平衡狀態(tài)的蛋白UCH-L1經(jīng)Sal B預(yù)處理后再受到氧化損傷時與正常培養(yǎng)細胞相比，表達量明顯上升，而直接氧化損傷時無明顯變化。 本實驗的研究表明：Sal B對細胞氧化損傷的保護作用與其抑制細胞凋亡及促進細胞防御系統(tǒng)蛋白表達有關(guān)；而這