丹酚酸B對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)作用的蛋白組學(xué)研究.pdf

1、治療心血管疾病的傳統(tǒng)中藥丹參中一個(gè)主要抗氧化水溶性成份-丹酚酸B(Sal B)對(duì)血管細(xì)胞有多重保護(hù)作用。為了闡述Sal B對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞EA.Hy926氧化損傷保護(hù)作用的機(jī)理，本研究在建立Sal B對(duì)EA.Hy926細(xì)胞氧化損傷保護(hù)模型的基礎(chǔ)上，運(yùn)用16O/18O標(biāo)記比較蛋白組學(xué)方法，對(duì)①正常培養(yǎng)細(xì)胞：②Sal B預(yù)處理后再用H2O2損傷的細(xì)胞；③直接用H2O2損傷的細(xì)胞中可溶性蛋白的表達(dá)情況進(jìn)行比較研究。 共鑒定出125個(gè)可溶性蛋

2、白，其中9個(gè)蛋白在三種不同情況下發(fā)生了顯著變化。其中7個(gè)蛋白分別屬于細(xì)胞轉(zhuǎn)錄翻譯調(diào)節(jié)因子、細(xì)胞凋亡路徑的抑制劑和細(xì)胞防御體系，它們的變化情況可以解釋Sal B的保護(hù)作用機(jī)制。在轉(zhuǎn)錄翻譯調(diào)節(jié)因子表達(dá)方面：細(xì)胞經(jīng)Sal B預(yù)處理后再受到氧化損傷時(shí)，與正常培養(yǎng)的細(xì)胞及直接受到氧化損傷的細(xì)胞相比，轉(zhuǎn)錄翻譯調(diào)節(jié)因子eIF4A-1和hnRNPA2/hnRNPB1的表達(dá)量明顯上調(diào)。在細(xì)胞凋亡途徑蛋白方面：①細(xì)胞凋亡路徑Rho路徑的抑制劑-Rho GD

3、P inhibitor 表達(dá)量在細(xì)胞經(jīng)Sal B預(yù)處理后再受到氧化損傷時(shí)，與正常培養(yǎng)細(xì)胞及直接受到氧化損傷的細(xì)胞相比明顯上調(diào)，Rho GDPinhibitor的上調(diào)有助于抑制細(xì)胞受到氧化損傷時(shí)Rho凋亡路徑的啟動(dòng)；②Caspase-3、Caspase-9的抑制劑HMBG1的表達(dá)量在細(xì)胞直接受到氧化損傷時(shí)與正常細(xì)胞相比明顯上調(diào)，而經(jīng)Sal B預(yù)處理其上調(diào)程度明顯增加，HMBG1的上調(diào)有助于抑制凋亡路徑中的最終凋亡執(zhí)行分子Caspase酶的

4、活性進(jìn)而阻止細(xì)胞走向凋亡。在細(xì)胞防御體系蛋白表達(dá)方面：①細(xì)胞防御體系中的熱休克蛋白HspB1和Hip在受到氧化損傷的條件下表達(dá)量均上調(diào)，而經(jīng)Sal B預(yù)處理這兩個(gè)蛋白的上調(diào)程度明顯增加；②維持細(xì)胞自身平衡狀態(tài)的蛋白UCH-L1經(jīng)Sal B預(yù)處理后再受到氧化損傷時(shí)與正常培養(yǎng)細(xì)胞相比，表達(dá)量明顯上升，而直接氧化損傷時(shí)無(wú)明顯變化。 本實(shí)驗(yàn)的研究表明：Sal B對(duì)細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用與其抑制細(xì)胞凋亡及促進(jìn)細(xì)胞防御系統(tǒng)蛋白表達(dá)有關(guān)；而這