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文檔簡介
1、分類號密級Y9 0 :3 2 6 5單位代碼學(xué) 號1 0 1 1 4B 2 0 0 4 0 4B 一淀粉樣蛋白3 1 - 3 5 片段對大鼠在體海馬長持續(xù)長時程增強( L - L T P ) 的抑制作用及其機制研究研 究 生指 導(dǎo) 教 師合作指導(dǎo)教師申請學(xué)位門類級別專 業(yè) 名 稱研 究 方 向張俊羞韭金必數(shù)援疊笸丞熬塑堂筮熬援匿堂墟±。 生理堂扭絲生物堂所 在 學(xué) 院: 出酉匡型去堂基礎(chǔ)醫(yī)堂瞳I(xiàn) 山西醫(yī)科- ^ 學(xué)博j j 學(xué)
2、位| 侖文關(guān),我們利用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)觀察了A 陽書對急性分離的海馬C A l 錐體細(xì)胞谷氨酸( G l u ) 、N M D A 和Y 一氨基丁酸( G A B A ) 受體通道電流的影響:除此之外,本研究在多數(shù)實驗中同時觀察了A p 2 5 - 3 5 的作用,由于它被認(rèn)為是A p 分子的活性中心片段,通過兩者的比較,試圖證實3 1 .3 5 片段是全長A B 分子發(fā)揮神經(jīng)毒性作用的更短的活性中心。第一部分:D 一淀粉樣蛋白3 卜3
3、 5 和2 5 —3 5 片段抑制大鼠在體海馬L - L T P為了研究兩個A B 片段對海馬C A l 區(qū)L .L T P 維持的影響及其機制,我們在多組H F S后1r a i n 經(jīng)側(cè)腦室注射A 陽l - 3 5 或A D 2 5 1 3 5 ,連續(xù)觀察并記錄了刺激海馬S c h a f f e r 側(cè)枝誘發(fā)的C A l 區(qū)興奮性突觸后場電位( f i e l de x c i t o r yp o s t .s y n a p
4、t i cp o t e n t i a l ,f E P S P ) 的變化。結(jié)果顯示:( 1 ) 在基礎(chǔ)的f E P S P 幅度保持穩(wěn)定的基礎(chǔ)上,給予三組H F S ( 每組三串,每串2 0個脈沖,頻率2 0 0 H z ,波寬5 0 I _ t s ,串間隔3 0 秒,組間隔5 r a i n ) 能夠有效誘導(dǎo)L —L T P 的出現(xiàn),若以H F S 前f E P S P 幅度為1 0 0 %,多組H F S 后,對照組( 注射
5、5 9 l 生理鹽水) 平均f E P S P幅度即刻增加到2 0 7 4 = k 9 .8 %( n = 7 ) ;這種突觸傳遞的增強效應(yīng)能維持較長時間( 至少3h ) ;在H F S 后1 h ,2h 和3 h 末,f E P S P 分別保持在1 6 4 .4 士3 .9 %,1 6 4 .6 士6 2 %和1 5 4 .7 士9 ,7 %。( 2 ) 在觀察A p 是否影響L - L T P 之前,我們預(yù)先觀察了2 5 n m
6、o l 濃度的A 陸I - 3 5 或A p 2 5 .3 5是否影響低頻測試刺激( 頻率O .0 3 3 H z ) 誘發(fā)的基礎(chǔ)f E P S P 。結(jié)果發(fā)現(xiàn),給予A B 2 5 - 3 5 前1 5 m i n和給藥后3 h 末的f E P S P 幅度分別是9 5 .6 士3 .4 %和1 0 7 .7 士1 4 .9 %,二者無統(tǒng)計學(xué)差異( n = 5 ,P > O .0 5 ) :側(cè)腦室注射A 艮m 5 并在相同時間點也
7、觀察到相似的效應(yīng)( 9 7 .9 = L l O 3 %和1 0 0 .8 士4 .7 %,n = 5 ,P > O .0 5 ) 。( 3 ) H F S 誘導(dǎo)出L .L T P 后,經(jīng)側(cè)腦室注射低濃度( 6 2 5n m o | )的A 1 3 2 5 _ 3 5 ,沒有觀察到對L —L T P 早期成份的明顯影響,但對L .U ’P 的晚期成份表現(xiàn)明顯壓抑。H F S 后3 0 r a i n 和6 0 r a i n 時,
8、L .L T P 值分別為1 6 10 土66 %( n = 6 ,P > O .0 5 ) 和1 5 0 .7 = L 65 %( P > O .0 5 ) ,和對照組相比( 1 7 1 .6 :L 4 .9 %,1 6 4 4 = k 3 9 %) 沒有顯著性差異:但在H F S 后3 h ,L .L T P 值下降為1 1 8 ,4 + 4 .1 %( n = 6 ,P < O 0 5 ) ,明顯低于對照組( 1
9、 5 4 .7 = L 9 .7 %,n = 7 ) 。( 4 )A B 2 5 _ 3 5 對L —L T P 的抑制具有一定的劑量依賴性效應(yīng):腦室注射高濃度( 1 2 .5n m o l 和2 5 n m 0 1 )的A 1 3 2 5 _ 3 5 ,t E P S P 幅度在H F S 后3h 分別由低濃度( 6 .2 5n m o I ) 時的1 1 8 .4 士41 %降低至1 0 3 .2 4 - 6 .6 %( n = 6
10、 ) 和7 29 士41 %( n = 7 ) ,且62 5n m o l 濃度組與2 5 ] l m o l 濃度組比有統(tǒng)計學(xué)差異( P < O .0 5 ) ;而且L —L T P 的早期成份也受到壓抑。( 5 ) 腦室注射低濃度( 6 .2 5n m 0 1 ) A 陸_ 3 5電觀察到類似于A 1 3 2 5 _ 3 5 的效應(yīng),但壓抑L T P 的效應(yīng)出現(xiàn)較早,在H F S 后6 0r a i n 即可看到( 1 3 8
11、 .5 士3 .3 %,n = 7 ,P < O0 5 ) 。腦室注射3 種不同濃度的A 阢m 5 ( 6 1 2 5n m o l ,n = 7 ;1 2 .5 n m o l ,n = 6 :2 5n m o l ,n = 8 ) 時,f E P S P 幅度在H F S 后3 h 分別為1 0 8 .9 士2 .2 %( P < O0 0 1 ) ,1 0 4 .9 士7 _ 2 %( P < O .0 0 1
12、) 和9 9 .5 4 - 37 %( P < O .0 0 1 ) ,和對照組( 1 5 4 .7 土97 %,n = 7 ) 相比,均有統(tǒng)計學(xué)差異,目.顯示出一定的劑量依賴性。( 6 ) 相同濃度的A p 2 5 _ 3 5 和A 艮I .3 5 相比較,在相同的記錄時間點上兩者對L —L T P 的抑制程度無統(tǒng)計學(xué)差異。以上結(jié)果表明,A p 2 5 _ 3 5 和A p 3 I _ 3 5 在不影響L .L T P 誘導(dǎo)的情
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