FK506-PDTC對大鼠同種異體胰十二指腸移植后急性排斥反應(yīng)的作用.pdf

1、第一部分大鼠胰十二指腸移植模型的建立 目的：建立合理的糖尿病大鼠模型和糖尿病大鼠胰腺移植模型。 方法：用四氧嘧啶誘導(dǎo)建立糖尿病大鼠模型，并以此為受體運用顯微外科器械和技術(shù)行大鼠胰十二指腸移植術(shù)。檢測術(shù)前、術(shù)后血糖和胰島素的變化，判斷胰腺移植治療糖尿病的效果。 結(jié)果：(1)適當(dāng)劑量的四氧嘧啶能誘導(dǎo)建立穩(wěn)定的糖尿病大鼠模型，血糖升高并穩(wěn)定，胰島素水平降低。(2)行胰腺移植后糖尿病大鼠血糖迅速下降至正常，胰島素水平有所

2、回升，并能維持穩(wěn)定。 結(jié)論：(1)使用四氧嘧啶能建立穩(wěn)定的I型DM大鼠模型；(2)以DM大鼠為受體進行胰腺移植能夠使DM大鼠的血糖和胰島素恢復(fù)至正常水平，是一個成功的移植模型；(3)改良的手術(shù)方法能改善手術(shù)成功率和大鼠存活時間，提高了該模型的實驗使用價值，為進一步的研究奠定了基礎(chǔ)。 第二部分RANTES和IL-10在大鼠胰十二指腸移植后急性排斥反應(yīng)中的意義 目的：探討RANTES和IL-10在大鼠胰十二指腸移植后

3、急性排斥反應(yīng)中的意義。 方法：SD大鼠60只分為兩組，實驗組取40只SD大鼠，以全胰十二指腸為供體，行20次SD-SD大鼠胰腺十二指腸移植；所余20只SD大鼠行開腹左腎切除對照組。分別在12h、1d、2d、3d取血清用ELISA法檢測RANTES和IL-10的變化；取移植組織行HE染色后觀察病理學(xué)改變。。 結(jié)果：(1)移植組移植胰腺出現(xiàn)急性排斥反應(yīng)，組織腫脹、壞死漸進性加重，鏡下單個核細胞浸潤逐漸明顯，在3d時最重。(2

4、)血清RANTES明顯升高(P<0．05)并且在3d內(nèi)較為穩(wěn)定。(3)IL-10的水平明顯高于正常(P<0．05)并在3d內(nèi)緩慢升高。(4)假手術(shù)組炎癥浸潤表現(xiàn)不明顯，血清RANTES和11-10水平無明顯上升(P＞0．05)。 結(jié)論：(1)大鼠胰腺十二指腸移植模型可以觀察到明顯的急性移植排斥反應(yīng)，其發(fā)生比較肯定，是研究胰腺移植的良好的模型；(2)大鼠同種異體胰十二指腸移植后T淋巴細胞的浸潤與RANTES的表達有密切的聯(lián)系，在R

5、ANTES高表達的同時有T淋巴細胞的大量浸潤；(3)IL-10在大鼠同種異體胰十二指腸移植后有明顯的上升，一定程度上能反映排斥程度的加重；(4)血清RANTES和IL-10的檢測有望作為判斷急性排斥反應(yīng)的客觀指標(biāo)之一，具有潛在應(yīng)用價值。 第三部分FK506／PDTC治療對胰十二指腸移植大鼠的作用 目的：探討FK506／PDTC單獨或聯(lián)合治療對胰十二指腸移植大鼠的作用。 方法：SD大鼠64只分為4組，每組移植8例。

6、未干預(yù)組：行大鼠胰腺十二指腸移植不作干預(yù)；FK506組：行大鼠胰腺十二指腸移植，術(shù)后1．7d每日給予FK5060．5rog／kg皮下注射；PDTC組：移植后l-7d每日給予PDTC200mg／kg肌肉注射；FK506／PDTC聯(lián)合治療組：移植后1．7d每日按上述劑量和給藥途徑同時給予上述藥物。分別在3d、7d分批處死各組4只大鼠，取移植物作HE染色觀察病理改變；組織塊行免疫組化染色和免疫熒光染色檢測RANTES和CCR5的表達情況；留取

7、血清檢測各組RANTES和IL．10的改變。 結(jié)果：(1)未干預(yù)組出現(xiàn)典型的移植后急性排斥反應(yīng)，鏡下觀察到單個核細胞的漸進性浸潤，移植物實體細胞的減少和纖維壞死組織的增多，免疫組化和免疫熒光染色見到大量的RANTES和CCR5表達于移植組織中，7d時更明顯。血清RANTES明顯增高呈時間依賴性，7d時最高（P<0．05)；IL-10明顯增高（P<0．05)，7d內(nèi)緩慢升高。(2)FKS06組鏡下見到排斥反應(yīng)減輕，單個核細胞的浸潤

8、減少，7d時纖維增生不明顯；免疫組化可見RA．NTES和CCR5的表達強度為中等，7d時未見加重。血清RANTES和IL-10有增高，但較未干預(yù)組明顯減低。(3)PDTC組鏡下見到排斥反應(yīng)減輕，單個核細胞的浸潤減少更為顯著，7d時纖維增生不明顯；免疫組化可見RANTES和CCR5的表達強度為中等，7d時未見加重。血清RANTES和IL-10有增高，但較未干預(yù)組明顯減低。(4)FK506／PDTC聯(lián)合治療組鏡下見到明顯的排斥反應(yīng)減輕，單個

9、核細胞浸潤明星減少，7d內(nèi)未見排斥加重；血清RANTES濃度進一步下降，較接近正常值，IL-10水平與FK506／PDTC單干預(yù)組相似，7d內(nèi)基本維持穩(wěn)定。 結(jié)論：(1)大鼠胰十二指腸移植后早期出現(xiàn)明顯的排斥反應(yīng)表現(xiàn)和相關(guān)細胞因子水平的改變，有時間依賴性。(2)FK506和／或PDTC能夠顯著降低胰十二指腸移·植大鼠RANTES及其受體CCR5的分泌和表達，二者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用。(3）FK506和／或PDTC對移植物具有明顯