串聯(lián)重復(fù)ASO探針?lè)聪虬唿c(diǎn)雜交檢測(cè)苯丙酮尿癥.pdf

1、　　苯丙酮尿癥是一種遺傳代謝病，其遺傳方式是常染色體隱性遺傳，具有明顯的遺傳異質(zhì)性，有3種臨床類(lèi)型：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。Ⅰ型苯丙酮尿癥是因?yàn)楸奖彼崃u化酶基因突變所致；Ⅱ型和Ⅲ型又稱(chēng)非經(jīng)典型苯丙酮尿癥，是由于四氫生物喋呤合成和循環(huán)中的缺陷，分別由編碼二氫生物喋呤還原酶和6-丙酮酰四氫生物喋呤合成酶的基因突變引起。在中國(guó)人中，經(jīng)典型苯丙酮尿癥占94％左右，非經(jīng)典型苯丙酮尿癥6％。　　通過(guò)新生兒篩查可以檢出苯丙酮尿癥，早期開(kāi)始飲食治療，可獲得較

2、好的臨床結(jié)果。但不同的遺傳類(lèi)型治療途徑不同，對(duì)于Ⅰ型苯丙酮尿癥，需要限制食物中的苯丙氨酸含量；而對(duì)于Ⅱ型和Ⅲ型苯丙酮尿癥，必須應(yīng)用四氫生物喋呤治療，低苯丙氨酸飲食治療無(wú)效。在產(chǎn)前診斷中，也需要針對(duì)不同的類(lèi)型進(jìn)行相關(guān)基因的檢測(cè)。因此臨床上需要對(duì)苯丙酮尿癥進(jìn)行鑒別診斷?！　≈袊?guó)人中大部分的PAH基因突變已經(jīng)明確，非經(jīng)典型苯丙酮尿癥的突變絕大部分為6-丙酮酰四氫生物喋呤合成酶基因突變。本研究是利用PCR技術(shù)特點(diǎn)、寡核苷酸探針雜交原理，建立一

3、種快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便的雜交方法，直接檢測(cè)苯丙酮尿癥病人的基因突變，進(jìn)行鑒別診斷，為臨床治療提供依據(jù)，為產(chǎn)前診斷提供新的途徑?！　♂槍?duì)中國(guó)人中常見(jiàn)的PAH和PTPS基因的8個(gè)突變點(diǎn)，即：PAH基因的IVS4(nt+1)G→A、204TAT→TGT、243CGA→CAA、356TAC→TAA、399GTA→GTT、413CGC→CCC、和PTPS基因cDNA259C→T、286G→A，本課題設(shè)計(jì)了8對(duì)引物；通過(guò)PCR擴(kuò)增、克隆，成功制備了這