人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞移植調(diào)節(jié)兔局灶性腦缺血再灌注炎性反應(yīng)和神經(jīng)保護(hù)的研究.pdf

1、目的：
　　研究人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,hUCB-MSCs)移植調(diào)節(jié)兔局灶性腦缺血再灌注損傷早期炎性反應(yīng)和神經(jīng)保護(hù)的機(jī)制。
　　方法：
　　采集臍帶血80ml-100ml,體外分離hUCB-MSCs并傳代培養(yǎng),取第6代培養(yǎng)的細(xì)胞做治療移植用。健康新西蘭大白兔64只,隨機(jī)分為假手術(shù)組、缺血再灌注組,MSC組,生理鹽水組,每組1

2、6只。采用線栓法建立兔大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO),MSC組通過(guò)右腿的股靜脈移植內(nèi)含3mL5×106個(gè) hUCB-MSCs懸液,生理鹽水組則采用同樣的方式注射等量的生理鹽水。早期(缺血30min,缺血再灌注后2h,4h,6h)檢測(cè)各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清及腦組織中的白細(xì)胞介素-1β(interleukinIL-1β)、IL-6、IL-10、腫瘤壞死因子-α(tumor n

3、ecrosis factor-α,TNF-α)和腦組織內(nèi)炎性細(xì)胞,評(píng)價(jià)hUCB-MSCs移植調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)的效果。神經(jīng)元凋亡、神經(jīng)生長(zhǎng)因子（nerve growth factor,NGF)、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、微管相關(guān)蛋白2(microtubule associated protein2,MAP2)、purdy評(píng)分的檢測(cè)用于評(píng)估hUCB-MSCs移植對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

4、的神經(jīng)保護(hù)作用。
　　結(jié)果：
　　缺血再灌注組和生理鹽水組血清中的IL-1β和IL-6在缺血后升高并在再灌注后2小時(shí)達(dá)到高峰,IL-10呈下降趨勢(shì)。MSC組IL-1β和IL-6在早期各時(shí)間點(diǎn)較缺血再灌注組和生理鹽水組明顯降低而IL-10顯著升高(P<0.05)。第3d時(shí)腦組織勻漿檢測(cè)炎性因子也有相似的變化,且 MSC組腦組織內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)情況較缺血再灌注組和生理鹽水組明顯減輕,浸潤(rùn)的炎性細(xì)胞數(shù)減少(P<0.05)。
　

5、　第3d時(shí),缺血再灌注組和生理鹽水組腦組織中有大量凋亡細(xì)胞且凋亡指數(shù)(apoptosis index,AI)較高,而 MSC組 AI較缺血再灌注組和生理鹽水組明顯降低(P<0.05)。MSC組血清NGF、BDNF含量較缺血再灌注組和生理鹽水組升高更為顯著(P<0.05)而Purdy評(píng)分降低(P<0.05),缺血皮層區(qū)的MAP2含量亦增加(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、臍血間充質(zhì)干細(xì)胞移植可以調(diào)節(jié)兔腦缺血早期的炎性反應(yīng)