大鼠局灶性腦缺血N-cadherin mRNA轉(zhuǎn)錄及蛋白表達和臍血間充質(zhì)干細胞移植的研究.pdf

1、第一部分大鼠局灶性腦缺血再灌注N-cadher in mRNA轉(zhuǎn)錄及蛋白表達背景和目的急性缺血性腦血管病是一種高發(fā)病率、高致殘率的臨床常見病.越來越多的證據(jù)已經(jīng)證明患病后機體發(fā)生了一系列自我修復(fù)過程.包括神經(jīng)細胞發(fā)生、突觸再生,神經(jīng)環(huán)路重建等可塑性變化.N-cadherin作為鈣依賴性細胞粘附分子亞家族的一個成員,于個體發(fā)育階段在控制機體形態(tài)發(fā)生方面擔(dān)負著重要的角色.它涉及神經(jīng)元間的粘連、神經(jīng)細胞的分化、遷移、神經(jīng)突起的外生、軸突成束、

2、組織結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性.它是否也參與了急性缺血性腦血管病發(fā)病后患病機體的自我修復(fù)尚未見有國內(nèi)外文獻報道.該研究的目的是為了觀察大鼠局灶性腦缺血損傷后腦組織神經(jīng)細胞內(nèi)N-cadherin mRNA轉(zhuǎn)錄及N-cadherin蛋白表達水平的變化.方法采用線栓法制作成年SD大鼠大腦中動脈供血區(qū)局灶性缺血再灌注模型,采用原位雜交染色及免疫組織化學(xué)染色技術(shù)觀察缺血再灌注后不同時間點腦組織不同部位神經(jīng)細胞內(nèi)N-cadherinmRNA的轉(zhuǎn)錄及蛋白表達.第二

3、部分 大鼠局灶性腦缺血后臍血間充質(zhì)干細胞移植的研究背景與目的干細胞移植治療腦血管病日益受到人們的重視.干細胞來源多取自骨髓間充質(zhì)干細胞,局部腦內(nèi)注入是主要途徑.考慮骨髓間充質(zhì)干細胞來源有限,反復(fù)多次腦內(nèi)注入移植干細胞臨床上是病人難以接受的,而臍血間充質(zhì)干細胞與骨髓間充質(zhì)干細胞特征相似,體外培養(yǎng)誘導(dǎo)后可向神經(jīng)細胞方向分化,因而我們決定以臍血間充質(zhì)干細胞作為干細胞來源,從靜脈途經(jīng)注入,觀察大鼠大腦中動脈阻斷后臍血間充質(zhì)干細胞在腦組織內(nèi)的分布

4、及分化情況.方法通過線栓法制作成年雄性SD大鼠MCAO模型.模型成功后于缺血再灌后1天、7天從靜脈注入被標記好的3×10<'6>個臍血間充質(zhì)干細胞.于注射后14、28天將大鼠處死并制作腦組織切片,用熒光顯微鏡觀察腦組織切片上用Dapi標記過的臍血間充質(zhì)干細胞的分布;采用免疫組化雙重標記染色觀察經(jīng)Brdu標記過的臍血間充質(zhì)干細胞在腦組織中的分化情況.結(jié)論1、臍血間充質(zhì)干細胞靜脈注射后能向缺血腦組織中遷移并部分分化成神經(jīng)細胞.2、靜脈注射臍