干擾TIGAR基因增強表阿霉素對HepG2細胞凋亡誘導作用的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討干擾TIGAR基因是否能增強表阿霉素對HepG2細胞的凋亡誘導作用
　　 方法:化學合成熒光標記的TIGAR-siRNA,通過WESTERN-BLOT檢測其干擾效能；噻唑藍(MTT)實驗計算表阿霉素(EPI)對HepG2細胞的半數(shù)抑制濃度(IC50),通過Western blot測定細胞經(jīng)RNA干擾和/或表阿霉素處理后的TIGAR蛋白表達情況,利用Hoechst染色,流式細胞術檢測細胞經(jīng)處理后的凋亡情況。
　　

2、 結(jié)果:細胞經(jīng)RNA干擾后的Western blot顯示TIGAR-siRNA可高效干擾TIGAR蛋白表達,干擾后約72小時干擾效果最佳。MTT結(jié)果分析顯示表阿霉素對HepG2細胞IC50為1.916μg/ml。Western blot結(jié)果顯示表阿霉素可增加TIGAR蛋白表達,但可被TIGAR-RNAi高效干擾。Hoechst染色及流式細胞術凋亡分析結(jié)果揭示,隨EPI濃度增加,細胞凋亡增加；TIGAR-RNAi本身并不能引起明顯的細胞凋

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