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1、目的:探討香煙煙霧提取物(CSE)對血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激和凋亡的影響,腺病毒介導(dǎo)GPX基因轉(zhuǎn)染血管內(nèi)皮細(xì)胞后,能否抑制香煙提取物致血管內(nèi)皮細(xì)胞的氧化應(yīng)激和凋亡。 方法:體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株(ECV304),取指數(shù)生長期細(xì)胞用于實驗。將ECV304分四組:分別予0%CSE(空白組)、10%CSE(CSE組)、LacZ+10%CSE(LacZ組)、GPX轉(zhuǎn)染+10%CSE(GPX轉(zhuǎn)染組)。收集各組干預(yù)24h后細(xì)胞爬片,TUNE
2、L法檢測細(xì)胞凋亡率(AI),H2DCFDA染色法,經(jīng)激光共聚焦顯微鏡檢測細(xì)胞內(nèi)ROS。 結(jié)果: 1.70MOI的腺病毒介導(dǎo)的LacZ轉(zhuǎn)染率高達(dá)(93.3±2.9)%。 2.10%CSE干預(yù)ECV30424h后,其AI高于0%及5%CSE干預(yù)組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p均<0-05)。10%CSE干預(yù)ECV30424h后,其AI高于0h、6h和12h組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p均<0.05)。 3.10%CSE干預(yù)
3、ECV30424h后,與空白組比較,其細(xì)胞內(nèi)ROS增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p均<0.05)。 4.腺病毒介導(dǎo)的GPX基因轉(zhuǎn)染后的ECV304,經(jīng)10%CSE干預(yù)24h后,與CSE組及LacZ組比較,其細(xì)胞內(nèi)ROS降低,AI降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p均<0.05)。 5.四組ECV304細(xì)胞內(nèi)ROS水平與AI呈正相關(guān)(n=5,r=0.775,p<0.01)。 結(jié)論: 1.CSE能導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激和凋亡,
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