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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察香煙煙霧提取物(Cigarette smoke extract,CSE)刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(Endoplasmic reticulum stress,ER stress)因子GRP78和炎癥因子CXCL-8、ICAM-1、E-selectin的表達(dá)、及其對(duì)人外周血中性粒細(xì)胞的趨化作用,探討CSE誘導(dǎo)的ER s
2、tress對(duì)中性粒細(xì)胞趨化作用的影響。
方法:
培養(yǎng)HUVECs,給予不同濃度的CSE(0%、5%、10%、20%)刺激24小時(shí),Real time-PCR法檢測(cè)GRP78、CXCL-8、ICAM-1、E-selectin mRNA的表達(dá)水平;用ER stress抑制劑4-苯基丁酸(4-phenylbutyrate,4-PBA)干預(yù),將HUVECs分為四個(gè)處理組:正常對(duì)照組(0%CSE)、CSE刺激組(10%CSE)
3、、ER stress抑制劑組(10%CSE+5mM4-PBA)和陰性對(duì)照組(10%CSE+PBS),ELISA法檢測(cè)CXCL-8蛋白表達(dá)水平,Transwell趨化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組培養(yǎng)上清對(duì)人外周血中性粒細(xì)胞的趨化作用。
結(jié)果:
CSE增強(qiáng)GRP78及CXCL-8、ICAM-1、E-selectin mRNA的表達(dá),并且呈濃度依賴(lài)性;ER stress抑制劑4-PBA明顯減少CXCL-8的分泌(p<0.05),并明顯減弱
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