復(fù)方扶芳藤膠囊質(zhì)量控制方法研究.pdf

1、目的：研究建立復(fù)方扶芳藤膠囊成品、中間體有效部位及各組方藥材的HPLC-ELSD指紋圖譜質(zhì)量控制方法，并對(duì)復(fù)方扶芳藤膠囊成品及中間體的有效部位和各組方藥材相應(yīng)部位的指紋圖譜進(jìn)行了相關(guān)性研究；研究建立復(fù)方扶芳藤膠囊中主要有效成分人參皂苷Rb1、黃芪甲苷和衛(wèi)矛醇的含量測(cè)定方法；通過建立指紋圖譜結(jié)合有效成分含量測(cè)定的質(zhì)量控制方法，以達(dá)到更有效地控制復(fù)方扶芳藤膠囊質(zhì)量的目的。
　　方法：（1）指紋圖譜測(cè)定采用高效液相色譜法，色譜柱：島津S

2、him-Pack CLC-ODS(6.0mmID×150mm)；柱溫：25℃；流動(dòng)相：A乙腈-B水，梯度洗脫；流速：1.0ml/min；檢測(cè)器：蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（蒸發(fā)溫度：115℃；霧化溫度：80℃，氣體流速：1.1L/min）；進(jìn)樣量：15μl；分析時(shí)間：65min；以保留時(shí)間與人參皂苷Rb1一致的色譜峰為參照峰，測(cè)定了10批復(fù)方扶芳藤膠囊成品及水提物中間體、醇提物中間體有效部位的HPLC-ELSD指紋圖譜；利用國(guó)家藥典委員會(huì)開發(fā)的中

3、藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（藥典2004A版）進(jìn)行相似度計(jì)算，分別建立了成品、中間體與藥材主要有效部位的HPLC指紋圖譜共有模式；通過對(duì)復(fù)方扶芳藤膠囊成品有效部位與中間體、處方各藥材相應(yīng)部位指紋圖譜色譜峰的相關(guān)性進(jìn)行研究，對(duì)成品有效部位指紋圖譜的色譜峰歸屬進(jìn)行了分析。
　?。?）采用RP-HPLC-ELSD法同時(shí)測(cè)定了復(fù)方扶芳藤膠囊中人參皂苷 Rb1和黃芪甲苷的含量。色譜條件：色譜柱：日本島津 Shim-Pack CLC-ODS

4、(6.0 mmID×150mm)；流動(dòng)相：A乙腈-B水，梯度洗脫；流速1.0ml/min；柱溫為25℃；分析時(shí)間：65min；檢測(cè)器：蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（蒸發(fā)溫度115℃，霧化溫度80℃，氣體流速為：1.1 L/min）。
　　（3）采用正相色譜法測(cè)定了復(fù)方扶芳藤膠囊中衛(wèi)矛醇的含量。色譜條件：色譜柱為L(zhǎng)ichrospher5-NH2柱(150 mm×4.6 mm,5μm)；流動(dòng)相為乙腈-水(90︰10)；流速1.0ml/min；柱溫

5、為28℃；檢測(cè)器為蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（蒸發(fā)溫度65℃，霧化溫度50℃，氣體流速為：0.9 L/min）。
　　結(jié)果：（1）建立的復(fù)方扶芳藤膠囊成品 HPLC指紋圖譜共標(biāo)定了19個(gè)共有峰，十批成品的相似度為0.947-0.998；水提物中間體 HPLC指紋圖譜標(biāo)定了15個(gè)共有峰，十批次的相似度為0.990-0.998；醇提物中間體HPLC指紋圖譜標(biāo)定了9個(gè)共有峰，十批次的相似度為0.999-1.00。建立的復(fù)方扶芳藤膠囊HPLC指紋圖

6、譜共有模式應(yīng)用于20批不同質(zhì)量的成品分析，結(jié)果表明所建立的共有模式可初步區(qū)分質(zhì)量不同的復(fù)方扶芳藤膠囊產(chǎn)品；對(duì)成品指紋圖譜中的14個(gè)色譜峰進(jìn)行了歸屬分析，確定其主要來源于黃芪和人參。
　?。?）本研究建立的RP-HPLC-ELSD法可同時(shí)測(cè)定復(fù)方扶芳藤膠囊中人參皂苷Rb1和黃芪甲苷的含量，結(jié)果表明：人參皂苷Rb1和黃芪甲苷分別在2.78～16.68μg，6.44～38.64μg范圍內(nèi)成良好線性關(guān)系，平均回收率分別為101.57％、9

7、8.20%，RSD分別為2.1%、2.2%(n=6)。
　?。?）本文建立的正相色譜法用于測(cè)定復(fù)方扶芳藤膠囊中衛(wèi)矛醇的含量，結(jié)果表明：衛(wèi)矛醇在2.91～29.1μg范圍內(nèi)成良好線性關(guān)系，平均回收率為99.25%，RSD為2.6%(n=6)。
　　結(jié)論：本研究建立了復(fù)方扶芳藤膠囊指紋圖譜結(jié)合有效成分含量測(cè)定的質(zhì)量控制方法。所建立的復(fù)方扶芳藤膠囊 HPLC指紋圖譜及主要有效成分人參皂苷Rb1、黃芪甲苷和衛(wèi)矛醇的含量測(cè)定方法具有較